辅助生殖技术

1978年Edward和Steptoe采用体外受精与胚胎移植技术诞生世界第一例婴儿(俗称试管婴儿),l这是人类生殖医学技术的重大突破。

【常用辅助生殖技术】

1.官腔内人工授精(intrauterine1insemination,lIUI)11宫腔内人工授精是指经激素测定、i超声显像等排卵监测手段确定排卵前后,l将经洗涤或优选后的精子通过专用的官腔内人工授精导管送入子宫腔内的技术。依据精子的来源分夫精人工授精(Artificial1Insermination1with1Husband’s1Sperm,lAIH)和供精人工授精(Artificial1Insrmination1by1Donor,lAID)。官腔内人工授精必须在腹腔镜或子宫输卵管造影或输卵管镜证实至少有一侧输卵管通畅的情况下使用。

夫精官腔内人工授精术适用于①存在阻碍精子进入宫腔的异常因素如男方的严重尿道下裂、i逆行射精、i阳痿或女方的阴道或宫颈狭窄等;②精液检查参数略低于正常标准、i精液不液化;③免疫因素或不明原因性不孕症。

供精人工受精适用于非阻塞性无精症患者或男方是严重的遗传性疾病携带者。必须严格控制供精的来源,l重视供精者的遗传筛查并排除供精子者HIV感染等性传播性疾病和其它传染性疾病,l禁止用新鲜精液进行AID,l必须采用由规范的精子库技术提供的精子。

人工授精的时机应在女方排卵前后进行。排卵时间的预测或确定主要根据超声显像、i激素测定、i基础体温、i宫颈粘液等监测进行综合判断。

2.体外受精与胚胎移植(in1vitro1fertilization1and1embryo1transfer,lIVF-ET)

体外受精与胚胎移植是将不孕症患者夫妇的卵子与精子取出体外,l在体外培养系统中受精并发育成胚胎后将优质胚胎移植入患者宫腔内,l让其种植以实现妊娠的技术。

(1)常规IVF-ET的适应证:i①女方各种因素导致的配子运送障碍。最常见的是各种原因导致的输卵管梗阻;此外,l以下因素经各种常规治疗仍然不孕的也可采用IVF-ET。②排卵障碍;③子宫内膜异位症;④男方少、i弱精子症;⑤不明原因的不孕;⑥免疫性不孕。

(2)常规IVF-ET治疗的过程

1)IVF术前准备:i不孕症夫妇在行IVF-ET治疗之前,l必须完成系统的不孕症检查以及常规体格检查,l排除不能耐受超排卵及妊娠的内、i外科疾病及肿瘤等,l确认病人具备恰当的适应证而无禁忌证。

2)控制性超排卵(controlled1ovarian1hyperstimulation,lCOH)及其监测:i采用FSH等药物刺激超排卵,l使多个卵泡发育,l以获得较多卵母细胞供使用。COH方案主要有使用GnRH激动剂降调节的超排卵方案(包括长方案、i短方案、i超短方案及超长方案)、i无降调节的超排卵方案以及使用GnRH拮抗剂的超排卵方案。

3)取卵:iB超引导下经阴道穿刺成熟卵泡,l抽吸卵泡液并从中获得卵母细胞。

4)体外受精:i获得的卵母细胞与经过梯度离心法或上游法处理的精子在取卵后2~6小时,l按约50000~100000精子/卵子的密度进行体外受精。

5)胚胎移植:i为获得较高的妊娠率,l通常移植多个胚胎。受精卵经过48~72小时的培养后(也可体外培养5天以获得囊胚),l将质量好的胚胎(1~3个)用导管移植入子宫腔内。如移植的胚胎能够植入子宫内膜并进一步生长发育,l则可建立妊娠。

6)黄体支持:iIVF-ET后一般需要进行黄体期的支持,l通常采用hCG或黄体酮。

7)随诊:iIVF-ET术后应密切观察注意各种并发症发生的可能。术后两周检测血清或尿β-hCG以判断妊娠。如妊娠经超声诊断明确子宫内有妊娠囊、i或流产、i宫外孕经病理检查发现妊娠物如绒毛组织则称临床妊娠,l仅有hCG阳性而不能确认临床妊娠者称生物学妊娠。

(3)IVF-ET结局:i近20多年来,lIVF-ET技术水平逐渐提高,l目前其临床妊娠率达到25%~60%,l其中有10%~20%流产,l2.4~9.6%异位妊娠,l多胎妊娠率达25%~50%。

3.单精子卵胞浆内显微注射技术(intracytoplasma1sperm1injection,lICSI)11单精子卵胞浆内显微注射是在显微操作系统的帮助下,l在体外直接将单个精子注入卵母细胞浆内使其受精。可克服严重的男性少弱精症患者在体外受精中由于精子数量过少或精子功能障碍不能穿透卵母细胞透明带达到精卵融合、i因而无法受精或受精率低下的问题。ICSI也适用于阻塞性或部分非阻塞性无精症患者。

4.卵子赠送技术(oocyte1donation)11卵子赠送技术是指采用健康的第三方(供者)自愿捐赠的卵子进行的辅助生殖技术。适用于卵巢早衰、i双侧卵巢切除后、i绝经过渡期、i绝经期、i超排卵反应不良、i严重遗传性疾病携带者等情况而又要求生育的女性。自身缺乏或没有足够的正常卵母细胞是其共同的特性。卵子赠送技术与常规IVF-ET治疗的过程相似,l其关键问题是处理供者与接受治疗的患者(受者)间生殖周期的同步。

5.胚胎植入前遗传学诊断(preimplantation1genetic1diagnosis,lPGD)11胚胎植入前遗传学诊断技术是指从卵母细胞或受精卵取出极体或从植入前阶段的胚胎取1~2个卵裂球或多个滋养层细胞进行特定的遗传学性状的检测,l然后据此选择合适的胚胎进行移植的技术。遗传学性状的检测方法以荧光原位杂交或各种PCR技术为主。目前常用于某些单基因遗传性疾病、i染色体数目或结构异常以及性连锁性遗传病的携带者等有可能分娩遗传性疾病后代的高危夫妇的胚胎选择。该技术的主要目的与不孕症的治疗无关,l但以辅助生殖技术为基础。应用PGD技术,l可以避免反复的选择性流产或引产和遗传性疾病患儿的出生。

【辅助生殖技术并发症】

1.卵巢过度刺激综合征(ovarian1hyperstimulation1syndrom,lOHSS)11OHSS的发生与所使用超排卵药物的种类、i剂量、i治疗方案、i病人的内分泌状况以及是否妊娠等因素有关。在接受超排卵治疗的病人中,lOHSS的总体发生率约为20%,l其中重度者约1%~10%。妊娠周期OHSS发生率高于非妊娠周期,l程度也较重。

OHSS的发病机制尚不完全清楚,l可能与多种因素有关。绒毛膜促性腺激素的使用是触发OHSS发生的重要因素。高表达的血管内皮生长因子、i一些炎症介质及细胞因子、i高水平的雌、i孕激素以及卵巢内与肾上腺无关的肾素-血管紧张素-醛固酮系统可能与之有关。

OHSS主要的病理生理变化是毛细血管的通透性增加、i体液大量外渗并继发一系列的改变,l导致腹水、i胸水;血液浓缩、i有效血容量降低;血液呈高凝状态;肾灌流量减少、i导致尿量减少,l甚至无尿,l同时可伴水、i电解质与酸碱平衡失调;临床表现为胃肠道不适、i腹胀、i呼吸困难、i少尿等,l患者双侧卵巢增大,l严重者心、i肺功能降低,l肝、i肾功能受损,l静脉血栓形成,l形成复杂的综合征。

治疗的主要措施包括提高循环胶体渗透压,l解除胸水、i腹水的压迫,l改善微循环以及毛细血管通透性,l纠正水、i电解质与酸碱平衡失调和血液浓缩状态,l保持有效血容量,l维持正常的尿量。出现器官功能障碍者给予相应处理。必要时使用抗凝治疗以预防血栓形成。对病情严重且难以控制的病人应果断中止妊娠。

2.多胎妊娠11促排卵药物的使用或多个胚胎的移植可导致多胎妊娠的发生。多胎妊娠率在使用克罗米酚后的妊娠中达5%~10%,l在使用绝经期促性腺激素后的妊娠中达20%~40%,l在体外受精与胚胎移植技术后的妊娠中可高达25%~50%,l甚至出现较多的高序多胎妊娠(三胎以上妊娠)。多胎妊娠可导致孕妇的妊娠并发症以及围产儿并发症明显升高,l围产儿死亡率也明显升高。

为减少多胎妊娠的发生,l应严格促排卵药物应用的适应证,l并实施适度的超排卵;此外,l在辅助生殖技术中减少移植胚胎的数目,l通过选择高质量的胚胎进行移植(如囊胚培养及其移植技术)或改善子宫内膜的接受性从而提高所移植胚胎的植入率,l摒弃通过增加移植胚胎的数目而提高妊娠率的方法。

多胎妊娠发生后,l减胎术可作为一种补救的措施。对于高序多胎妊娠,l其意义特别重要。减胎术是实时超声显像引导下的介入方法,l包括经阴道和经腹部两种途径,l对较早期(孕7周前后)的胚胎可经阴道途径进行胚胎的吸引,l较大的胚胎可采用胚心部位注入10%KCl致死胚胎的方法。妊娠物可逐步被完全吸收或形成纸样儿在分娩时排出。术后应监测母体的凝血功能,l注意感染、i出血等并发症。减胎术后的流产率为5.4%~9.1%。

3.其它并发症11体外受精技术穿刺取卵时可能损伤邻近肠管、i输尿管甚至血管,l引起出血和感染等并发症。经辅助生殖技术治疗获得的妊娠与自然妊娠比较,l其流产率、i早产率、i异位妊娠率、i宫内外同时妊娠率均较高。

采用辅助生殖技术的妊娠均应视为高危妊娠,l加强和重视围生期保健,l及时防治产科并发症,l以得到良好的产科结局。