近年来角膜缘干细胞体外培养技术的发展和完善为更好的研究角膜缘干细胞的生物学特性和临床应用提供了平台。角膜缘干细胞的消化液多选用DispaseⅡ或胰蛋白酶-EDTA，l培养的方法有细胞悬液培养、i组织块培养和细胞-组织混合培养等，l研究者可根据实验室条件和各自研究经验加以选择。为了获得角膜缘干细胞的纯培养，l还可以通过5-Fu毒性选择、in-庚醇处理、iⅣ型胶原差异贴附等方法将角膜上皮细胞和短暂扩充细胞等掺杂细胞去除。角膜缘干细胞在体外生长、i分化需要营养成分和特殊条件，l应根据研究目的来选择培养基，l培养基中添加血清可以促进干细胞的增殖，l但不明成分太多，l不便于研究角膜缘干细胞的增殖和分化调节因素。近年来，l多采用添加了胰岛素、i霍乱毒素、i转铁蛋白等辅助成分的无血清低钙培养基，l或利用3T3细胞作为饲养细胞(放射线照射或丝裂霉素处理失活的swiss鼠胚肺成纤维细胞)来进行干细胞的培养，l研究其在体外的增殖和分化特性。此外，l活体正常角膜上皮部分暴露在空气中，l气液交换界面培养模拟了这一情况，l可更好的对干细胞向上皮细胞的分化过程进行研究。

角膜缘干细胞培养后进行临床移植，l载体的选择是关键之一，l目前研究中的载体有羊膜、i卵壳膜、i聚乳酸膜等，l其中脱上皮细胞羊膜具有良好生物活性，l适合干细胞的生长，l是较理想的移植载体，l为培养细胞的临床移植奠定了实验基础。体外培养的角膜上皮干细胞移植重建眼表的基础临床实验初获成功，l但是培养后的角膜缘干细胞生理、i生化以及移植后的生物学性状、i治疗眼表疾病远期效果、i免疫排斥反应的防治、i更有效的载体等方面需要进一步的研究。