不洁性交史及相应的症状、i体征有助临床诊断，l但确诊尚需依靠下列辅助检查。

1.1组织病理11其特征可见有3个垂直排列带：i①浅表层：i由多形核粒细胞、i红细胞、i纤维蛋白、i坏死组织组成坏死层。②中层：i显示水肿和新生成的垂直于皮肤表面的血管，l并可见有血管内皮细胞显著增生，l可导致血栓形成及继发性坏死。③深层：i为嗜中性粒细胞、i淋巴细胞组成的浸润，l伴有成纤维细胞增生.在浅层和深层中间可见有革兰或吉姆萨染色

阴性的软下疳杆菌，l受累淋巴结的组织病理改变呈重度急性炎症改变，l有多形核粒细胞浸润及坏死。

2.分泌物涂片检查11用藻酸钙拭子或棉拭子自溃疡边缘的潜行处或基底部取材，l先用生理盐水洗净患处脓液，l取其渗出液用革兰染色，l可见革兰阴性典型软下疳杆菌。

3.培养11可由淋巴结或溃疡处取材，l软下疳生长条件要求严格，l在33～35℃和C02环境中易于生长应选择加有1％必需的x因子及3μm1Van1Conmycin巧克力培养基，l常用含有人血或兔血的琼脂培养基、i胚胎牛血清培养基(TBSA)、i加氧巧克力培养基(CA)等菌落生长后应进行生化鉴定(主要为氧化酶试验)。但需要复杂的培养条件，l且需专家鉴定。一般不作为常规检查。

4.伊东一雷斯特纳(ho-Reenstierno)反应11采取致死的H.Ducreyi混悬液提取的抗原制成菌苗.以0.1mm在前臂或股内侧皮内注射，l24～36h后局部出现直径在10mm以上的红肿为阳性，l出现硬结或脓毒为强阳性。软下疳患者100％为阳性，l从感染开始5～20天即可出现阳性。有些患者虽已治愈仍可出现阳性，l因此，l也可证明此人曾患过软下疳。

5.其他11间接免疫荧光技术已被采用，l对1H.Ducreyi特异性的单克隆抗体已经产生。用全部溶解的H.Ducreyi杆菌作为抗原建立的ELISA方法，l特异性及敏感性均好，l但尚未应用于临床。