肠道病毒感染性疾病:人轮状病毒感染性疾病

轮状病毒胃肠炎是波及全球的一种常见疾病,l是病毒性胃肠炎中最常见的一种。主要发生在婴幼儿。发病高峰在秋季,l故又名“婴幼儿秋季腹泻”。亦可引起成人腹泻。

(一)疾病概况

【病原学】

人轮状病毒(Rotavlrus,l简称RV)归类于呼肠孤病毒科轮状病毒属,l为双股RNA病毒,l外形类似车轮,l故称轮状病毒。RV内壳蛋白VP6为群和亚群的特异性抗原,l根据VP6抗原性的不同,l目前将RV分为A、iB、iC、iD、iE、iF、iG七个群。A群主要感染婴幼儿,lB群主要感染成人,lC群主要引起散发病例。RV的外壳结构蛋白VP4、iVP7具有中和抗原活性,l刺激机体产生中和抗体。依据VP7糖蛋白的抗原性不同区分的血清型称为G型;VP4为蛋白酶敏感蛋白,l按其抗原性区分的血清型称为P型。

【流行病学】

RV分布于全世界。发病有明显的季节性,l高峰在秋季。

1.传染源 患者与无症状带病毒者是主要的传染源。

2.传播途径 主要经粪-口或口-口传播,l亦可通过水源污染传播。

3.易感性 人群普遍易感,l但RV主要侵犯6~24个月龄儿童。

【发病机制】

RV病变部位主要位于十二指肠及空肠,l侵犯小肠绒毛上皮细胞,l上皮细胞脱落,l代之以缺乏消化酶的菱形或方形上皮细胞,l导致吸收功能障碍,l肠腔渗透压升高,l使液体进入肠腔而造成渗透性腹泻。

【临床表现】

潜伏期1~3天。起病急,l多先吐后泻,l伴轻、i中度发热。腹泻每日十到数十次不等,l呈水样便,l可有少量粘液,l无脓血,l无腥臭味。在显微镜下检查可有脂肪球和少量白细胞。患儿可出现轻、i中度脱水。部分病例在出现消化道症状前常有上呼吸道感染症状。本病为自限性疾病,l病程约1周左右。

(二)检验诊断

【一般检查】

外周血白细胞总数及分类大多正常,l少数偏高,l分类淋巴细胞增加;粪便常规镜检大多无特殊发现,l少数可见少量白细胞。粪便培养无致病菌生长。

【病原学检查】

用分离培养技术检测RV的灵敏度较低,lRV在一般组织培养中不适应,l需要特殊细胞株培养,l如恒河猴胚肾细胞MA104株和非洲绿猴肾传代细胞CV-1株。培养前应先用胰酶处理病毒,l以降解病毒多肽VP3,l该多肽能限制病毒在细胞中的增殖。在培养时细胞维持液中也应含有一定浓度的胰蛋白酶。目前只有A组RV可以培养,l主要用于RV的基础研究,l临床诊断价值有限。

【免疫学检查】

1.血清学检查 感染后5天,l血中可检测出特异性IgM抗体,l有助于本病诊断。

2.1RV电镜检查 电镜技术具有快捷、i简便的优点。相对于单纯依赖形态学观察的普通负染电镜技术,l免疫电镜技术(Immune1electron1microscopy,lIEM)通过在电镜下检测特异的凝集反应或利用特异的抗体标记物检测抗原物质,l具有更高的灵敏度和特异性。

3.免疫学技术检测抗原11目前在RV的检测技术中,l可靠性和实用性符合要求的依然是WHO推荐的免疫学技术检测患者粪便等标本中的RV抗原。在乳胶凝集试验(LA)、i酶免疫测定(EIA)、i放射免疫测定(RIA)、i免疫金染色法(IGS)等技术的基础上,l随着新标记物的应用以及固相载体技术和抗体制备技术的发展,l免疫定量技术,l如时间分辨荧光免疫测定(TR-IFMA或TrFIA)和定量乳胶凝集试验(QLAT)等免疫学新技术相继用于RV的检测,l不仅简化了检测步骤,l而且提高了免疫学方法检测RV的特异性和灵敏度。近年发展的单克隆抗体技术相对于过去采用的高效价抗血清和多克隆抗体,l不仅克服了体外培养病毒的限制,l减少了对高价免疫血清的需求,l提高了特异性与灵敏度,l还可进行血清分型、i毒株鉴别,l适用于大规模临床检测和流行病学调查。

【核酸检测】

与其他RNA检测系统相比,l聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)或琼脂糖凝胶电泳通过分析特异性的双链RNA基因组带型,l在对RV感染的流行病学及临床分析方面具备优势。由于RV基因组经常发生基因漂移以及基因组片段的重配,l因此基因型与血清型之间并没有明确的一一对应的关系。

分子探针技术通过特异的寡核苷酸探针与待测基因序列的互补结合检测轮状病毒,l具有很高的灵敏度和特异性。用于RV检测的分子探针大多为cDNA探针。针对基因7、i8、i10、i11的探针对于鉴定毒株最为可靠,l针对基因6、i9的探针(基因6、i9分别编码组特异性抗原VP6和型特异性抗原VP7),l可鉴定病毒株的亚组、i亚型。

用于RV检测的经典PCR技术是逆转录PCR(RT-PCR)后又发展了半定量、i定量PCR。多数学者认为RT-PCR不应取代对于检测粪便标本中RV具有高度灵敏度和特异性的免疫测定。

(三)诊断建议

根据轮状病毒感染性腹泻多发生于秋季,l多侵犯婴幼儿,l粪便多呈水样,l无脓血,l无腥臭味,l粪便镜检大多无特殊发现,l培养无致病菌生长等临床特点不难进行诊断。粪便作直接或免疫电镜检查发现RV颗粒或检测到粪便RV抗原可以确诊。感染5天后血清学可检测出特异性IgM抗体,l亦有助于本病诊断。从粪便中提取病毒RNA检查有无RV-RNA电泳图谱,l既有诊断价值,l还可区分不同型病毒感染。

RV胃肠炎应与下列疾病鉴别诊断:i急性细菌性痢疾、i其他细菌或病毒引起的肠道感染、i阿米巴痢疾及生理性腹泻等。