隐孢子虫病(Cryptosporidiosis)是由隐孢子虫(Cryptosporidium)引起的人兽共患疾病。临床以腹泻、i体重减轻等为主要症状。本病是引起AIDS患者严重的慢性腹泻的主要原因之一，l也可发生在免疫力正常的人群。目前由隐孢子虫引起的腹泻越来越受医学界的重视。

(一)疾病概况

【病原学】

隐孢子虫是一种专性细胞内生长的原虫。有23个种，l能引起人感染的隐孢子虫主要是微小隐孢于虫(C.parvum)，l鼠隐孢子虫(C.muris)也可使人致病。

隐孢子虫的生活史分为无性增殖、i有性生殖和孢子生殖三个阶段，l包括滋养体、i裂殖子与裂殖体、i雌、i雄配子、i子孢子与卵囊等不同的形态。其生活史在同一宿主体内完成，l生活周期约5～12天。卵囊为本虫感染阶段，l成熟的卵囊含有4个新月形子孢子。当人或哺乳动物吞食后，l经消化液作用，l子孢子在小肠脱囊逸出，l附着在肠上皮细胞微绒毛表面，l发育形成滋养体、i成熟裂殖体，l裂殖体破裂释放出裂殖子，l裂殖子大部分再次侵犯肠上皮细胞并继续分裂发育。少部分裂殖子侵人上皮细胞发育为雌、i雄配子，l受精结合形成合子。约80％的合子形成厚壁卵囊从痰或粪便排出，l其余20％的合子形成薄壁卵囊，l其子孢子逸出后直接侵人宿主肠上皮细胞，l造成宿主体内自身重复感染，l使虫体在宿主体内持续存在。

【流行病学】

本病呈世界性分布。多发生于气候温暖的夏秋季节，l恶劣的生活居住条件和不良卫生习惯易引起本病流行。

1.传染源　患者和无症状排卵囊者均为本病传染源，l感染动物也是本病的重要传染源。

2.传播途径11主要通过污染的食物或水经消化道传播。人与感染的宠物接触也可造成感染。

3.易感性　各年龄组人群均可感染本病。感染率高低与机体的免疫功能有关，l新生儿、i婴幼儿感染率高，lAIDS患者易受感染。感染后宿主可产生一定的免疫力，l能降低再感染时的病情严重程度。

【发病机制】

发病机制尚未明确。可能有许多因素参与，l如肠黏膜吸收消化功能失调，l肠壁渗透压改变，l肠道内双糖酶损失，l虫体产生的毒素和代谢产物的作用等。免疫功能正常者感染主要位于空肠；免疫功能低下者，l从食道到直肠及呼吸道、i胆道均能发现隐孢子虫。

【临床表现】

根据宿主免疫功能状况，l本病临床表现可分两种类型。

1.免疫功能正常型　潜伏期7～10天。主要表现为腹泻，l每日4～10次不等，l粪便量多，l为水样便或粘液样便，l偶有少量脓血，l可有恶臭。一般持续数日，l最长30天左右。常伴有低热、i腹痛、i恶心、i呕吐等消化道症状。严重腹泻可引起水和电解质紊乱。

2.免疫功能低下型　潜伏期不定，l症状多而重，l持续时间可长达数月甚至直至死亡。主要表现为严重的难治性腹泻，l水样便，l量多，l伴有水电解质紊乱及体重下降。病程长的常有营养不良、i低蛋白血症、i维生素缺乏，l易合并肺部感染。

(二)检验诊断

【病原学检查】

主要是从患者粪便、i呕吐物或者痰液中查找虫体和卵囊。由于卵囊排出呈间歇性，l故需反复多次检查。

1.直接涂片法　用于检查原虫的卵囊、i包囊、i滋养体。连续3次涂片以提高检出率。滴1滴生理盐水于洁净的载玻片上，l用竹签挑取绿豆大小的粪块，l在生理盐水中涂抹均匀，l厚度以透过涂片隐约可辨认书上的字迹为宜。显微镜下观察虫体由卵囊所构成，l但不含孢子囊，l含4个子孢子和一个残体。子孢子呈细长的月牙状；残体是一个有膜包围的液泡，l液泡周围有许多颗粒。在高倍镜下，l隐孢子虫的卵囊为透明反光的圆或椭圆形小体，l可见到子孢子，l但有时不清晰，l而球状残体比较清晰，l用碘液染色不着色。

对于大批量样本可用金胺酚染色过筛，l阳性或可疑样本用改良抗酸染色法染色。在蓝绿色背景下可见玫瑰红色卵囊，l囊内有四个呈月牙形的子孢子及颗粒状残留体，l子孢子在囊内排列多不规则，l导致卵囊的外观往往呈多形性，l有的子孢子聚集在中间，l似“实心”状；有的贴在囊壁上，l中间淡染，l似环状；还有的散在，l呈玫瑰花状或不定形的块状；残留体为暗棕色的颗粒物，l大小不一。敏感性不高，l需要101000～1001000孢子才会出现阳性结果。

2.间接免疫荧光染色法　粪便标本经饱和盐水离心浓集，l取浓集物置载玻片上，l加人微小隐孢子虫卵囊特异性单克隆抗体，l孵育洗涤后加荧光标记抗鼠IgG／IgM复合物，l反应后在暗室用荧光显微镜检查，l呈现黄绿色荧光，l背景为黑色无荧光。该法特异性高、i敏感性强，l对肠道内常见的其他原虫卵囊或包囊以及真菌均无交叉反应，l是一种用于临床诊断和流行病学调查的好方法。

3.培养技术　隐孢子虫已在人胚胎细胞和鸡胚组织培养获得成功，l为制备隐孢子虫抗原，l发展更新的免疫学诊断方法创造了条件。但体外培养费时，l且难以控制，l故临床上很少用此方法诊断隐孢子虫病。

【免疫学检查】

可采用IFA、iELISA等方法。ELISA法：i①检测抗原时采用对卵囊有高亲和力的单克隆抗体。敏感性和特异性分别为66％～100％和93％～100％；②检测抗体可用感染动物小肠切片作抗原底片，l可以检出隐孢子虫患者血清特异性IgG、iIgM、iIgA型抗体。急性感染者可于60天内出现IgG抗体并可持续1年之久。IgM抗体出现早但消失也快，l且在AIDS患者不一定出现。以卵囊作固定抗原，l检测血清抗体，l特异性、i敏感性均高，l重复性好，l是隐孢子虫感染的首选筛查方法之一；③免疫印迹试验，l用去离子剂处理的可溶性子孢子抗原经SDS-PAGE后转移到硝酸纤维膜上，l与患者血清抗体反应。患者血清在感染后3周即可识别分子量为201000的抗原带，l并可持续5个月以上，l反复接触卵囊者其血清识别能力在1年以后仍很强。

【核酸检测】

PCR技术可检出每ml粪便中100个卵囊，l结合核酸探针杂交，l敏感性可提高到每ml粪便中5个卵囊。

(三)诊断建议

对急、i慢性腹泻患者，l尤其是以水样腹泻为特点的患者及有免疫缺陷的成年患者，l若不能排除隐孢子虫病者，l应多次取粪便进行隐孢子虫相关病原体检查或血清学检查，l确诊需依据在粪便中找到隐孢子虫卵囊。诊断时应注意与霍乱、i病毒性胃肠炎、i阿米巴痢疾和细菌性痢疾相鉴别。