卡氏肺孢子虫肺炎

卡氏肺孢子虫肺炎(Pneumocystis1carinii1pneumonia,lPCP)是由卡氏肺孢子虫(Pneumocystis1carinii)引起的肺部炎症,l它的病理和临床特点是间质性肺炎,l以发热、i干咳、i呼吸困难及低氧血症为主要特征。本病多见于免疫功能低下或有缺陷者,l可认为是一种机会性感染。近10余年由于AIDS的蔓延,l本病发病率明显增高。

(一)疾病概况

【病原学】

过去认为卡氏肺孢子虫属原虫,l但近年对卡氏肺孢子虫形态学和分子生物学分析证实属于真菌。卡氏肺孢子虫的发育阶段有3种主要形态:i滋养体、i包囊前期和包囊。哺乳动物为惟一宿主,l肺是主要寄生部位,l全部生活史可在一个宿主体内完成。

1.滋养体 可分小滋养体和大滋养体两种。小滋养体由包囊内的囊内小体逸出而成,l常聚集成簇。小滋养体逐渐增生为大滋养体,l一般认为大滋养体是主要的致病阶段。

2.包囊前期 为一过渡形态。大滋养体胞膜逐渐增厚形成囊壁,l发育为包囊前期。

3.包囊 包囊前期囊壁进一步增厚,l形成含数个囊内小体的包囊。发育成熟的包囊为圆形,l囊内胞质几乎完全被吸收,l出现8个呈新月形的囊内小体。

【流行病学】

卡氏肺孢子虫广泛存在于自然界,l也普遍存在于人或某些哺乳动物呼吸道内。PCP以散发为主,l尚未见人群暴发流行的报道。

1.传染源 PCP患者及健康带虫者均是传染源。

2.传播途径 目前认为本病可能通过飞沫传播。

3.人群易感性 未成熟儿、i营养不良或有先天性免疫功能缺陷的婴幼儿、i血液病、i恶性肿瘤、i恶性组织细胞病、i器官移植患者、i长期应用较大剂量的免疫抑制剂者、iAIDS患者都很容易并发PCP。

【发病机制】

卡氏肺孢子虫的致病机制尚未明确。

【临床表现】

潜伏期为1~2个月,l起病缓慢,l病情逐渐加重。大多数患者以干咳为首发症状,l呼吸困难进行性加重,l体温正常,l或仅有低热。临床症状明显而肺部体征相对轻微为其重要特征。大多死于呼吸衰竭。AIDS患者并发PCP,l潜伏期大多不能确定,l临床表现亦不典型。

(二)检验诊断

【病原学检查】

主要从呼吸道或肺组织取材,l染色后查卡氏肺孢子虫滋养体和含8个囊内小体的包囊为确诊依据。

1.标本的处理

(1)收集痰液或支气管分泌物作涂片:i患者先彻底漱口,l雾化吸人3%NaC1,l深部咳嗽,l收集24小时痰液,l加入5倍量二硫苏糖醇液,l混匀,l37℃水浴10分钟,l中间过程振荡5分钟,l双层纱布过滤。31000转/分钟离心10~15分钟,l沉渣直接涂片染色,l高倍镜和油镜检查。雾化诱导法获得的痰标本涂片检出率不高。

(2)支气管肺泡灌洗液(BAL):i将纤维支气管镜插人支气管,l注入无菌生理盐水20ml,l用吸引器吸出,l重复5次,l共注人生理盐水100ml,l一般可回收40~50ml灌洗液,l经离心沉淀,l取沉渣涂片,l染色镜检,l检出率可达69%~85%。

(3)肺组织活检:i活组织材料作切片、i印片或组织磨碎后涂片,l苏术精伊红染色观察,l此法检出率可达75%~95%。如果联合以上两种方法检测,l则阳性率更高。

2.染色方法 有姬姆萨(Giemsa)染色、i六亚甲基四胺银染色(Gomori’s1methenamine1silvernitrate1stain,lGMS)和亚甲胺蓝(TBO)染色。

(1)Giemsa:i是最基本的简便易行染色法。高倍或油镜下观察滋养体形状多变。大小为2~5μm,l胞质淡蓝色,l核1个呈深紫色。包囊呈圆形或椭圆形或月牙形,l大小约4~6μm,l囊壁不着色,l透明似环状,l囊内小体5~8个,l清晰呈紫红色团状,l易与真菌鉴别。缺点是周围组织也同样染上颜色,l缺乏对比,l容易漏检。该方法检测痰标本的敏感性为67%,l特异性为100%。

(2)GMS:i为镀银染色法。高倍镜或油镜观察包囊壁呈棕色或褐色,l圆形、i椭圆形或月牙形,l部分包囊可见括弧样结构,l此为肺孢子虫特征性标志,l有诊断价值。囊内小体不着色。此法特异性强,l可作为确诊依据。该方法检测痰标本的敏感性为71%,l特异性为100%。

(3)TBO:i染色后高倍镜或油镜观察,l囊壁呈紫蓝色,l囊内小体不着色,l背景淡蓝色。

标本石蜡切片经二甲苯脱蜡,l去二甲苯后进行以上几种染色;也可将标本固定后用直接荧光标记的单克隆抗体染色,l检查肺孢子虫。

目前,l痰液检查是一种快速、i敏感、i无创伤性的诊断方法,l几种染色方法同时进行可以提高阳性率。

【免疫学检查】

常用方法有对流免疫电泳检测抗原(CIE)、iIFA、iELISA等,l但抗原制备不易,l且大多数健康人可能有隐性感染,l故检测血清抗体一般不适用于肺孢子虫病的诊断。有报道,l采用单克隆抗体-免疫酶染色法检查患者肺组织切片,l阳性率达90%~100%。

【核酸检测】

用特异性引物扩增患者痰液中虫源性DNA片断,l检出率高达100%,l可检出每ml痰液中78个包囊,l较TBO染色的敏感性高出100倍。检测卡氏肺孢子虫的PCR方法分为单一PCR和巢式PCR。单一PCR所用引物扩增卡氏肺孢子虫的编码线粒体rRNA的DNA片段(mr1rRNA1gene1PCR);巢式PCR所用引物扩增卡氏肺孢子虫的编码核糖体RNA基因的内部转录间隔的DNA片段(Pc-ITS-PCR)。检测的标本为肺组织活检标本、iBAL、i痰液、i口腔含漱液和血清标本。

(三)诊断建议

免疫功能低下或长期接受免疫抑制药物治疗的患者,l如病程中出现原发疾病无法解释的发热、i干咳、i进行性呼吸困难而肺部体征很少,l肺部X线检查符合间质性肺炎时,l均应考虑本病。痰液或支气管肺泡灌洗液病原学检查如发现卡氏肺孢子虫包囊即可确诊。如多次检查仍未发现,l又不能排除本病者,l则可取肺活检标本做进一步检查。必要时可进行试验性治疗。本病应与衣原体肺炎、i肺结核、i肺真菌感染等鉴别。