贾第虫病

贾第虫病是由蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia1lamblia,l简称贾第虫)引起的消化道疾病,l尤其在旅游者中,l本病较为常见。近年来,l由于在艾滋病患者中发现常伴有贾第虫的合并感染,l在同性恋人群中也可相互传播,l因此,l贾第虫感染的严重性和危害性日益受到普遍关注。

(一)疾病概述

【病因学】

蓝氏贾第鞭毛虫由荷兰科学家van1LeeuWenhoek于1681年首先发现。1859年,lLambl对该寄生虫作了详细的描述。过去一般认为贾第虫是一种无致病性的共生性原虫。但20世纪70年代以来,l由于许多国家多次发生该原虫感染的爆发性流行,l人们才确切地认识到其致病性。贾第虫主要寄生于人和哺乳动物的小肠,l引起以腹泻为主要症状的贾第虫病。

【流行病学】

贾第虫病呈世界性分布,l尤其多见于环境卫生条件差和医疗水平低下的地区,l据WHO估计全球感染率为1%~20%左右。在该虫感染流行区,l儿童的感染率很高。另外,lHIV感染或AIDS患者也易合并贾第虫的感染。十几年前,l我国寄生虫分布调查结果显示,l全国平均感染率为2.419%,l其中西藏和新疆的感染率超过8%。本病的传染源主要为带虫者和患者。人感染贾第虫后,l无论是否有临床表现,l粪便中均可有包囊排出,l然后经粪-口途径得以传播,l其中以饮水污染传播最常见。近年来发现,l贾第虫在同性恋者中可通过口-肛门、i口-外生殖器接触或男性同性恋者的肛门(直肠)-生殖器等异常性行为造成包囊经口感染,l导致同性恋者中发病率显著升高,l是引起同性恋肠病综合征病原体之一,l因此该病被列为性传播疾病。

【临床表现】

人体感染贾第虫后,l虫体引起的机械性损伤和化学性损伤,l可导致肠黏膜炎症并影响其吸收功能;当虫体大量繁殖时,l可形成机械性阻隔而影响物质吸收,l同时还与宿主竞争营养;肠道内细菌的协同作用也可导致肠功能失常。而宿主的免疫状态也是疾病发生的重要因素。贾第虫病在旅游者中甚为常见,l故又称为旅游者腹泻。感染贾第虫包囊后部分感染者成为无症状带虫者,l另一部分则出现临床症状。潜伏期一般为2周左右,l临床症状和体征可表现为:i

1.全身症状全身症状有失眠、i兴奋、i头痛、i头昏、i出汗、i营养不良、i贫血或伴低热或寒战等。

2.胃肠道症状

(1)急性期:i有恶心、i厌食、i腹胀、i腹痛,l可出现恶臭水样腹泻,l粪便无脓血,l含较多脂肪颗粒。部分患者急性期持续数天即可自行消退,l转为无症状带囊者。幼儿患者病程可持续数月,l出现营养不良、i贫血、i发育不良、i体重下降。

(2)亚急性或陧性期:i急性期若未及时治疗,l可转为亚急性期或慢性期。亚急性期感染症状主要表现为间歇性恶臭粥样便,l伴腹胀、i痉挛性腹痛、i恶心、i食欲不振等。慢性患者最多见,l表现为周期性稀便,l较臭,l反复发作,l病程往往迁延数年不愈。

3.胆道症状贾第虫滋养体可寄生于胆囊或胆管,l引起胆囊炎或胆管炎。多以在十二指肠引流液或胆汁液内查得滋养体为诊断依据。但有人认为,l十二指肠引流液或胆汁液中的滋养体可能是引流过程中从肠壁脱落而人所致。实际上,l滋养体并不寄生于胆囊或胆道。

(二)检验诊断

贾第虫病采用的检验诊断方法主要包括粪便、i小肠液和小肠活组织检查病原体,l以及免疫学诊断方法和新近发展的DNA探针技术。检出贾第虫滋养体或包囊是确诊的依据.免疫诊断和核酸检测可作为病原诊断的辅助方法。

【病原学诊断】

1.粪便检查为首选方法。取急性期腹泻患者新鲜粪便做生理盐水直接涂片,l镜检查找滋养体。对亚急性或慢性患者的成形粪便,l可用碘染色法、i硫酸锌离心浮聚法或醛醚沉淀法查包囊。因包囊排出具有间歇性,l粪便检查应隔日进行,l并连续3次,l以提高检出率。

2.小肠液检查适宜于临床症状明显,l而粪检多次阴性者。方法2①十二指肠引流法:i采集十二指肠引流液直接涂片查滋养体,l或离心取沉淀物检查,l可提高检出率;②肠检胶囊法:i让患者禁食后吞下一粒装有尼龙线的胶囊,l3~4小时后轻轻抽出尼龙线,l刮取线上附着物涂片镜检查滋养体。

3.小肠话组织检查适用于临床症状明显,l但粪检和小肠液检查都为阴性的患者。取小肠Treitz韧带附近黏膜组织,l先做压片检查,l再进行Giemsa染色镜检。虫体染成紫色,l而肠上皮细胞呈红色。本法准确可靠,l但患者不易接受。

【免疫学检测】

1.酶联免疫吸附试验(ELISA) ELISA检钡4抗贾第虫抗体阳性率高,l多用于流行病学调查。临床上多用ELISA双抗体夹心法检测粪便中的包囊抗原,l以明确诊断。本法所用抗原为贾第虫特异性抗原(GSA)65,l为糖蛋白,l在滋养体和包囊阶段均有存在,l但后者含量较多。ELISA双抗体夹心法在贾第虫病流行病学调查时敏感性为92%~98%,l特异性为98%~100%。目前已有基于ELISA的多种检测粪便中贾第虫抗原的试剂盒出售:i①CELISAR:i澳大利亚研制生产,l原理与双抗体夹心法完全相同,l只是捕获抗体为单克隆抗体,l其靶抗原为30kD和65kD的滋养体抗原和包囊抗原,l目测结果的敏感性和特异性可分别达95%和91%;②ProspecT:i由美国研制生产,l以稀释的粪样与抗贾第虫抗体孵育,l检测GSA65抗原;③Triage:i即Triage寄生虫膜上酶免疫试剂盒,l将α1-贾第虫素包被于免疫层析条上检测贾第虫,l敏感性为83.3%~95.9%,l特异性为97.4%~100%,l测试时间约为15分钟。但对粪便标本要求较高,l须新鲜粪便或是立即冻存者,l否则会影响结果的判读;④ColorPAC;全称为ColorPAC复合快速固相定性免疫层析试验,l操作简单,l完成试验约需10分钟,l敏感性为98.8%,l特异性为100%,l所用粪样不需浓缩,l冻存粪便也可。

2.间接荧光抗体试验(IFA)本法的阳性率高于ELISA法,l在诊断贾第虫病方面有很强的特异性。基于免疫荧光抗体的试剂盒为CEL-IF(英国研制生产),l以荧光素标记的抗包囊壁组分的单克隆抗体直接检测经丙酮固定粪样中的包囊,l具有省时、i定量和直接观察包囊形态的优点。CEL-IF试剂盒的敏感性和特异性均几乎达100%,l完成一次测试只需2~3分钟。但该试剂盒要配置荧光显微镜,l限制了它的应用,l同时检测价格较高,l目前还不适合我国现场使用。

3.对流免疫电泳(CIEP)11是检测贾第虫病患者粪便内抗原的有效方法,l特异性较高,l但其敏感性要低于ELISA与IFA。

4.间接血凝试验(IHA)本法敏感性高,l操做简便,l快速,l但特异性与重复性不够理想。

【分子生物学检测】

1.核酸探针用生物素标记的贾第虫滋养体基因组DNA或用放射性物质标记的DNA片段制成的DNA探针,l检测粪便中的贾第虫具有较高的敏感性和特异性,l是较有发展前景的诊断工具。

2.PCR1PCR方法检测贾第虫包囊的hsp、i贾第虫素和SSUrRNA基因也在研究之中。

3.非编码基因间rDNA间隔区PCR本法主要用于分子流行病学研究。

4.TPI-PCR/RFLP人群中发生贾第虫感染的爆发流行时,l必须对环境污染物、i供水系统的原水水源、i爆发地点的动物感染状况等传播因素进行调查,l以确定传染源并估计流行趋势,l为制定干预措施提供理论依据。TPI-PCR/RFLP即可对不同来源的分离株包囊进行基因分型,l达到上述目的。

5.同工酶和脉冲场凝胶电泳。