滴虫病

(一)疾病概述

【病因学】

寄生于人体的滴虫主要有阴道毛滴虫、i人毛滴虫和口腔毛滴虫三种,l其中的阴道毛滴虫主要寄生于女性阴道、i尿道内,l可引起滴虫性阴道炎、i尿道炎,l即性传播疾病中的滴虫病。男性也可感染,l发生滴虫性尿道炎及前列腺炎。

【流行病学】

滴虫病主要由性交传播,l呈世界性分布,lWHO估计每年全球约有1.8亿该病患者。虫病的感染率各地报道不同,l一般为5%~20%。高危人群是一些低经济收人者、i多性伴者妓女、i文盲和生殖器不洁者。我国的滴虫病感染率曾一度有所下降,l但近些年随STD的流行发病率又开始上升。

【临床表现】

阴道毛滴虫的致病力随虫株毒力、i宿主生理状况及阴道内细菌菌群改变而不同。滴虫的阿米巴样运动、i对阴道、i尿道上皮组织的粘附和释放毒性分泌物都会导致组织损害。正常情况下,l健康妇女阴道具有“自净”作用,l可抑制虫体和其他细菌的生长繁殖。当感染滴虫时,l阴道内乳酸的形成受到影响,l使pH转为中性或碱性,l虫体又得以大量繁殖,l同时也有利于细菌的继发性感染,l加重炎症反应。滴虫性阴道炎的临床表现主要为白带增多,l黄绿色,l泡沫状,l有臭味;持续性阴道及外阴搔痒,l性交痛,l部分患者有下腹疼痛;外阴阴道潮红、i水肿,l阴道壁、i子宫颈可见斑点样出血,l呈草莓状;后穹窿常充满稀薄灰黄色及泡沫状分泌物。滴虫侵袭尿道时可出现尿频、i尿急、i尿痛等症状。也有部分感染者不出现症状,l成为带虫者,l具有传染性。男性感染也可致前列腺炎。

(二)检验诊断

【病原学诊断】

1.直接镜检采用悬滴法。取阴道后穹窿分泌物作生理盐水涂片,l置高倍镜下观察。若见到卵圆形,l有鞭毛波动膜活动的滋养体,l即可确诊。男性患者可采用前列腺液或清晨第一次排尿前的尿道分泌物或晨起第一次尿液的沉渣作悬滴法镜检。悬滴法是诊断阴道毛滴虫最简便的方法,l检出率很高。如在生理盐水中加5%的中性红,l活虫不着色,l而背景为粉红色,l使虫体更容易识别。也可在新鲜标本涂片上滴加1滴吖啶橙液(1:i11600稀释),l置于荧光显微镜下观察,l如有滴虫存在,l则可见淡黄绿色的虫体。

2.涂片染色法取阴道分泌物、i尿液沉渣或前列腺液涂片,l自然干燥、i火焰固定后染色(如瑞特染色,l姬姆萨染色)镜检。瑞特染色虫体显示清楚,l同时还能看到细菌和霉菌。姬姆萨染色,l虫体胞质呈浅蓝色,l鞭毛、i波动膜及核呈红色。

3.培养法将阴道分泌物或尿道分泌物加入肝浸液培养基或Diamond’s培养基,l于3T℃培养48小时,l取培养物镜检。若阴性应连续培养7日并定期检查。本法比直接镜检和染色法更为敏感,l适于带虫者、i轻度或慢性感染者的诊断及疗效评价。

【免疫学检测】

常用的免疫学方法有荧光抗体检查法,lELISA法,l胶乳凝集法等,l其阳性率较涂片法高,l但临床一般不采用免疫学方法检查。

1.酶联免疫吸附试验(ELlSA)ELISA法敏感、i特异。不过在抗体检测的诊断中需用可溶性抗原,l而抗原的标准化仍未解决,l使得该法的使用受到限制。但用阴道毛滴虫全虫抗原进行斑点酶联免疫吸附试验(dot-ELISA),l或用阴道毛滴虫的单克隆抗体进行夹心法ELISA检测可溶性抗原.成为阴道毛滴虫检测的发展方向。

2.荧光抗体试验Krieger、iBickley等用荧光素结合的抗体检测临床标本,l敏感性为86%~95%,l本法具有较好的敏感性和特异性。

3.胶乳凝集试验(LAT)将抗阴道毛滴虫抗体结合到聚苯乙烯胶乳微粒上,l该胶乳试剂与阴道毛滴虫的可溶性或不可溶性抗原结合,l产生特异性凝集,l可用于阴道毛滴虫病的快速诊断。

4.免疫层析毛细试纸条法11是一种滴虫快速榆测试验技术,l可在10分钟内检测出结果。此法敏感、i快速,l有望提高阴道毛滴虫的检出率。

另外,l聚丙烯酰胺凝胶电泳、i酶联免疫印迹试验和双向凝胶电泳等方法,l可鉴别不同虫株的阴道毛滴虫。

【分子生物学检测】

1.核酸杂交技术

1)DNA原位杂交:i用克隆的阴道毛滴虫pROS21的DAN片段或其PCR产物(pLAE11)作为探针,l与标本中的原虫进行原位杂交,l可用于本病的诊断。

2)affirm1VP微生物确证实验11本实验为美国MicroProbe公司生产的一种自动化检测系统。将处理过的虫体RNA与探针分析卡上的脱氧核糖核酸探针(affirm1VP1DNA探针)杂交,l最后显色检测。敏感性和特异性可分别达到90.0H和99.8%。

2.聚合酶链反应(PCR)技术PCR技术主要是针对阴道毛滴虫基因组的某些特异区域。