细菌性阴道病

一、i疾病概述

细菌性阴道病(bactenal1vaginosis,lBV)为阴道内正常菌群失调所致的一种混合感染,l但临床及病理特征无炎症改变。在性活跃的妇女中发病率远远高于正常人群。对于具有阴道菌群失调而无症状者,l称为无症状细菌性阴道病。

【病因与发病机制】

细菌性阴道病是正常寄生在阴道内的细菌生态平衡(菌群)失调。生理情况下,l阴道内有各种厌氧菌及需氧茵,l其中以产生过氧化氢的乳杆菌占优势。细菌性阴道病时,l阴道内乳杆菌减少而其他细菌大量繁殖,l主要有加德纳菌、i类杆菌及其他厌氧菌,l部分患者可合并支原体感染,l其中以厌氧菌居多,l其数量可增加100~11000倍。厌氧菌繁殖的同时可产生胺类物质,l碱化阴道环境,l使阴道分泌物增多并有特殊臭味。BV相关病原体还可使阴道分泌物中唾液酸酶、i胶原酶等物质活性增高。促使阴道菌群发生变化的原因仍不清楚,l可能与频繁性交、i性伴侣数目、i阴道灌洗或妇科手术有关。

【临床表现】

约10%~40%患者无症状,l有症状者的主要表现为阴道分泌物增多,l有恶臭味,l可伴有轻度外阴瘙痒或烧灼感。分泌物呈灰白色,l均匀一致,l稀薄,l分泌物容易从阴道壁拭去,l阴道黏膜无充血等炎症表现。

【诊断与鉴别诊断】

l983年,lAmsel等提出BV诊断的4项标准,l即:i

1.匀质、i稀薄、i白色阴道分泌物,l常粘附于阴道壁。

2.阴道分泌物pH>4.5。

3.胺试验(whiff1test)阳性。

4.线索细胞阳性。

以上有3项符合即可诊断BV。

该病应与滴虫性阴道炎、i外阴阴道假丝酵母菌病相鉴别,l通过典型的白带及相应的病原体检测,l多能确诊。

二、i检验诊断

目前对细菌性阴道病的实验室诊断,l主要采用阴道分泌物的细菌学检验、i免疫学试验和细菌代谢产物测定等方法。

1.阴道分泌物显微镜检查

(1)检查方法:i

1)阴道菌群检查:i取阴道分泌物涂片作革兰染色,l在显微镜下观察革兰阳性杆菌和革兰阴性菌的比例。①直接判断:i阴道分泌物中只有乳杆菌,l每视野在6~30个,l阴道加德纳菌未见或仅见少许,l为BV阴性;阴道分泌物中混合有多种菌群,l包括阴道加德纳菌和其他革兰阴性或阳性杆菌,l而乳杆菌无或每视野少于5个,l属BV阳性;②评分后判断:il983年Spiehel等根据显微镜下细菌形态的不同,l制定了一个评分标准,l判断标准以每个油镜视野平均的乳杆菌的数量而定。每油镜视野乳杆菌的菌数≤l个为l+、i1~5个为2+、i6~30个为3+、i>30个为4+。正常阴道分泌物乳杆菌为3+~4+,l无或少许阴道加德纳菌;BV患者阴道分泌物乳杆菌为l+~2+,l含有大量阴道加德纳菌和其他革兰阴性或阳性杆菌。

2)线索细胞检查:iBV患者阴道分泌物中阴道加德纳菌、i类杆菌和革兰阳性球菌等一种或几种细菌大量增多,l粘附在上皮细胞表面,l使细胞溶解.边缘呈锯齿状模糊不清,l形成BV所特有的线索细胞。其检查方法为在洁净玻片加1滴生理盐水,l将阴道分泌物与生理盐水混匀,l加上盖玻片后,l显微镜检查,l在高倍镜下观察到阴道鳞状上皮细胞表面被覆许多球杆菌和球菌,l使上皮细胞表面毛糙或有细小的颗粒,l好像撒上了一层面粉,l即为线索细胞阳性。

(2)临床诊断意义及评价:i

1)正常阴道菌群以乳杆菌占优势,l为革兰阳性大杆菌,l末端钝圆或平齐,l单个、i链状或栅状排列,l细菌性阴道病时乳杆菌减少或消失,l以阴道加德纳菌和类杆菌为主的革兰阴性或染色不定的小杆菌、i球杆菌或弯曲杆菌增多。阴道分秘物涂片检查可为BV的诊断提供参考。

2)线索细胞是BV的必然产物,l是诊断BV的主要指标。

2.阴道加德纳菌检查

(1)检查方法:i

1)阴道加德纳菌分离鉴定:i①分离培养:i阴道加德纳菌在普通培养基上不生长,l将阴道分泌物分区划线接种于血平板或巧克力琼脂上生长,l37℃需氧环境中培养24~48小时,l观察细菌生长情况;②阴道加德纳菌的鉴定:i阴道加德纳菌在血平板或巧克力琼脂上为灰白色,l细小半透明的菌落;在羊血琼脂培养基上不溶血,l在人或兔血琼脂培养基上出现溶血环;氧化酶及过氧化氢酶阴性;葡萄糖、i麦芽糖、i糊精阳性;甘露糖醇、i山梨醇阴性。

2)阴道加德纳菌免疫荧光检测:i吖啶橙染色免疫荧光检测法是一种新的较为理想的检测手段,l吖啶橙是一种具有异染性染料,l根据病原体DNA或RNA对吖啶橙染料的吸附方式不同所放射的荧光也不同来检测,l阴道加德纳菌在侵袭的靶目标上皮细胞上聚集,l当吖啶橙染色后在荧光照射下,l发射出桔红色荧光,l能清晰地检测出加德纳菌在上皮细胞上的聚集现象。利用荧光显微镜观察结果,l在上皮细胞中发现成堆桔黄色细小杆菌为阳性。

3)阴道加德纳菌的基因检测:i近年来研究证实,l阴道加德纳菌的致病性与生物分型有关,lIIS区基因的多态性是导致阴道加德纳菌发生不同生物型的原因之一。根据阴道加德纳菌位于IIS-23S1rRNA基因区序列作特异性引物,l应用聚合酶链反应扩增阴道或宫颈分泌物中的阴道加德纳菌,l可用于阴道或宫颈分泌物中加德纳菌的快速检测。

(2)临床诊断意义及评价:iBV是阴道中乳杆菌与其他多种菌群间的平衡失调所致,l因此对单一种类细菌的分离培养在BV诊断中的价值受到限制。由于阴道加德纳菌可在95%的BV妇女中被分离到,l所以曾一度认为该菌就是BV的病原菌,l但后来的研究发现,l在无BV症状的正常妇女中,l该菌培养阳性率可达36%~55%,l因此,l对阴道加德纳菌的检测结果,l必须同时结合临床表现方能作出判断。但阴道分泌物中未检出阴道加德纳菌有助于排除BV的诊断。

3.微生物代谢产物测定

(1)阴道pH测定:iBv患者阴道生态系统紊乱,l造成厌氧菌大量繁殖,l产生丁二胺、i三甲胺等氨类物质,l使pH升高,l碱化阴道环境。

1)检测方法:i用无菌棉拭子取出阴道分泌物,l与pH范围为3.8~6.0的精密pH试纸直接接触,l与标准pH比色带

比较得出阴道分泌物的pH值。

2)结果评价:i正常成人阴道分泌物pH14.0左右,lBV时pH>4.5,l通常为4.7~5.7,l大多为5.0~5.9。

(2)胺试验:i阴道加德纳菌能产生高浓度的丙酮酸和氨基酸,l被阴道厌氧菌脱羧生成胺,l在碱性环境中形成挥发性氨而逸出。

1)检查方法:i将阴道分泌物滴于玻片上,l加l~8滴10%氢氧化钾溶液,l闻到氨味或鱼腥样气味,l为胺试验阳性。

2)临床诊断意义及评价:i胺试验阳性为诊断BV的主要指标之一,l但该试验要求大量的阴道分泌物,l检测敏感性较低。

(3)气液相色谱分析法检测酸碱代谢产物:i1980年Spie-gel等用气液相色谱法分析阴道分泌物中不易挥发的脂肪酸。此法需要特殊仪器装置,l尚未在临床广泛应用。

(4)唾液酸酶检测:i研究证实,l阴道分泌物中唾液酸酶活性与BV之间存在一定的量的关系。BV患者阴道中的优势菌,l如普雷沃菌、i类杆菌等能产生大量的唾液酸酶。BV患者阴道分泌物中唾液酸酶的含量明显高于其他妇女。

BV(BVBLUETM)是一种l临床使用较为广泛的唾液酸酶活性检测试剂,l主要含有细菌唾液酸酶专性可生色底物IBX4041,l当含有IBX4041的溶液和细菌唾液酸酶接触时,l会产生化学反应,l依据加入足量酶后底物出现颜色不同而判断。

1)检查方法:i将阴道分泌物浸入测试管溶液中,l于37℃保温10分钟,l加入1~2滴显色液,l3分钟观察结果,l黄色为阴性,l绿色至蓝色为阳性。

2)临床诊断意义及评价:i用Bv蓝试验诊断BV,l敏感性、i特异性均较高,l且操作简便、i快速,l但检测成本较高。

(5)脯氨酸氨肽酶检测:iBV患者阴道中的优势菌,l如阴道加德纳菌和弯杆菌能产生脯氨酸氨肽酶,l检测阴道分泌物中此酶含量可以辅助诊断细菌性阴道病。

1)检查方法:i用ELISA方法检测,l检测产物为β-萘胺,l通过显色剂判断结果,l黄色为阳性结果,l无色为阴性。

2)临床诊断意义及评价:i①BV患者阴道分泌物中脯氨酸氨肽酶活性高于正常妇女;②体外实验证实多种细菌、i真菌和阴道毛滴虫也能产生脯氨酸氨肽酶,l故该法特异性较差。

【应用建议】

1.阴道分泌物线索细胞阳性为诊断BV的主要指标,l可作为检验诊断的首选方法。

2.唾液酸酶检测结果可靠,l操作简便、i快速,l但检测成本高,l可根据患者情况考虑选用。

3.阴道分泌物pH检查、i胺试验及阴道加德纳菌培养可作为BV的辅助诊断方法。

4目前临床对BV的诊断一般根据线索细胞、i阴道分泌物pH、i胺试验等检查结果结合患者临床症状采用Amsel标准诊断。