细菌性感染的确诊主要是对病原菌进行分离柱查和鉴定。随着现代检测技术和检测仪器的发展，l为细菌的检测和鉴定带来重大变革。利用标记免疫技术、i仪器，l可快速敏感地检测标本中致病原的抗原或抗体。利用分子生物学中的DNA探针，l可自标本中直接检测到病原微生物。目前，l临床实验室常用于细菌诊断方法总结如下：i

(一)显微镜直接检查

取病人待检标本，l涂片染色后用显微镜直接检查，l该方法可在短时间内作出初步诊断或确定诊断。如流行性脑膜炎患儿的的脑脊液或淤点涂片，l经革兰氏染色查脑膜炎奈瑟菌、i痰涂片经抗酸染色查抗酸杆菌、i脑脊液墨汁染色查新型隐球菌等。

(二)细菌分离培养与鉴定

各类细菌都有其各自的培养生长特性。根据细菌培养要求、i生化反应的不同，l可对其进行菌种鉴定。目前，l各种细菌培养基的标准化、i商品化.使细菌分离培养简便易行。而根据微生物数字编码分类产生的商品生化反应试剂条，l可快速简便的对分离的微生物进行鉴定。1985年第一合自动化细菌分析仪器Vitek-AMS成功进人中国，l为自动化在我国细菌检验界的应用展现了美好前景。目前市场上常见的自动化鉴定仪有Vitek-AMS、iWalkawav、iAutoScan-4.ATB1Expression、iArise、iAuto-Reader等。该类鉴定仪不仅有强大的细菌鉴定功能，l而且还能提供药敏数据。

(三)免疫学检查

1.细菌性感染病特异抗体检查11对于一些细菌感染性疾病，l当临床出现症状时，l想要在较短的时间内检测到病原体较为困难。在这种情况下，l可依靠抗体检测来确定诊断。特异性IgM或IgG抗体的出现或是补体结合及凝集抗体的滴度增高，l是宿主与病原体间的急性相互反应的一个指标，l从而提示某一急性感染。

2.细菌抗原检查11利用特异性抗体检查对应细菌的抗原物质，l从而判定某种细菌感染。如脑脊液菌体抗原的检测，l就是采用乳胶凝集实验原理，l针对可能导致脑膜炎的脑膜炎奈瑟菌、i流感嗜血杆菌和肺炎链球菌抗原设计的快速检测方法。近年来，l随着免疫学诊断技术的发展，l市场上有多种商品试剂盒供应。

3.分子生物学检测技术

(1)聚合酶链反应(PCR)：i利用DNA天然复制双螺旋结构，l在体外经DNA聚合酶的作用下，l科学设计引物，l通过变性、i退火和延伸三步法数十个周期的循环，l即可将标本中极少的DNA片段进行数百万倍的扩增。目前该技术已广泛应用于结核杆菌、i淋病奈瑟菌和幽门螺杆菌的鉴定诊断。

(2)微生物DNA杂交与基因探针技术：iDNA探针就是带有标记分子的能与特定核酸杂交的单链核酸片段，l它可通过液相或固相核酸杂交来检测特定微生物的存在。细菌的核酸杂交可以对细菌种属的亲缘关系作出分类和鉴定。基因鉴定技术是一项特异性强、i敏感、i简单、i快速的检测方法，l特别适用于直接检出临床标本中微生物，l而不受非病原微生物的影响。该项技术对那些尚不能分离培养或很难分离培养的微生物的检测具有特殊的意义。