【病因】

通常认为HS是一种常染色体显性遗传病。由于基因异常造成红细胞膜蛋白的缺乏，l破坏了膜支架的稳定性，l包括单纯收缩蛋白缺乏、i收缩蛋白与锚蛋白联合缺乏、i带3蛋白缺乏、i蛋白4.2缺乏，l部分红细胞胞膜丢失导致表面积储备减少，l与体积的比例下降，l变形能力减低，l在脾脏中容易破坏。同时，l膜支架异常改变了胞膜通透性，l钠离子内流，l渗透压升高，l水分子内流，l细胞肿胀，l接近球形。钠离子内流还使Na-K-ATP酶活性代偿性升高-以泵出更多的钠离子，l细胞内ATP相对缺乏，lCa-Mg-ATP酶受到抑制，l钙沉积于细胞膜，l致使细胞膜钢性增加，l柔韧性减低，l被大量阻滞于脾素内，l处于缺氧、i低糖、i酸性环境，l造成红细胞破坏溶解。

【外周血象】

呈正细胞性贫血。血片中胞体小、i染色深、i中心淡染区消失的红细胞(即球形红细胞)增多，l大于10％。是本病宴验室检查特征之一。网织红细胞明显增多，l常在5％～20％，l甚至更高。病情较重时血片中以小、i圆红细胞为主，l中心淡染区显著缩小，l呈圆点状(面积储备亦减低)，l伴以球形红细胞明显增加，l偶见其他变形红细胞。MCV大多正常或轻度减低，lMCHC大多增高，l达35％～38％。白细胞、i血小板质、i量大致正常。

【骨髓象】

增生常呈明显活跃。红细胞系统增生显著，l可占有核细胞的25％～60％。粒细胞系统构成比相对减低，l形态大致正常。巨核细胞系统常不受累。但并发再障危象时三系细胞均显著减少。

【红细胞渗透脆性试验】

(1)原理：i红细胞置于一系列浓度递减的低渗氧化钠溶液中，l球形红细胞表面积减少，l与容积的比值减小，l即面积储备下降，l对水分渗入的缓冲能力减低，l渗入少量的水分即可将细胞胀破，l发生溶血，l此即渗透脆性增高。而正常红细胞通过释放储备的表面积，l增大容积来缓冲同量的水分渗入，l不致溶血。扁平型红细胞表面积与容积比例增大，l比正常红细胞有更多的面积储备，l渗入较正常更多的水分也不致溶血，l表现为脆性减低。故此项检查主要反映红细胞表面积与其容积的比例大小。

(2)方法：i取1001℃烘干的分析纯NaCl置100ml容量瓶中，l分别配置成0.66％、i0.64％、i0.62％、i0160％、i0.58％、i0.56％、i0.54％、i0.52％、i0.50％、i0.48％、i0146％、i0.44％、i0.42％、i0140％、i0.38％、i0.36％、i0.34％、i0.32％、i0.30％、i0.28％、i0.26％、i0.24％、i0.22％、i0.20％、i0.18％、i0.16％、i0.14％浓度的NaCl溶液备用。

用肝素抗凝管取病人血2ml，l如病人溶血严重，l须洗血球，l用等渗盐水将红细胞洗涤后再配成50％红细胞悬液再进行试验。

取u形底小试管若干，l放成两排，l每排数目相等，l加人上述各浓度NaCl溶液0.25ml。用6号针头将红细胞悬液滴入各管中，l每管1滴，l轻轻摇匀，l室温静置，l于2小时或24小时观察结果。每次试验均应同时作正常人对照。

从浓度高的一管开始观察。上清液刚开始出现红色的那管溶液浓度为开始溶血浓度；管底刚开始无红细胞沉积的那管溶液浓度为完全溶血浓度。记录下这两个浓度。

(3)参考值：i开始溶血：i0.42％～0.46％；完全溶血：i0.28％～0.34％。

(4)注意事项：i患者与正常对照溶血浓度相差0.04％或以上为脆性增高。试剂浓度一定要准确。时间太长应及时更换，l以免水分蒸发、i浓度升高。结果不易判断时可离心沉淀后观察。如有必要，l可进行更高或更低浓度的检测。如患者巳输血，l原则上不宜再做本试验。如确需检查，l应当注明。

(5)临床意义：i脆性增高主要见于HS。温抗体型自身免疫性溶贫患者之红细胞有继发的球形化趋势，l脆性也可增高。此外，l尚可见于遗传性椭圆形红细胞增多症患者。

脆性减低主要见于红细胞呈扁平状的低色素性贫血患者，l如地中海贫血、i缺铁性贫血、i某些肝硬化及阻塞性黄疸等。

【酸化甘油试验(AGLT)】

(1)原理；将红细胞置于20～28℃的酸化甘油缓冲液中会发生溶血，l其光密度会下降。光密度降到开始时的一半所需的时间，l即AGLT50。正常人红细胞30分钟后光密度才开始轻度下降，l而HS症患者红细胞由于膜的缺陷，l溶血速度很快，lAGLT50明显缩短。

(2)试剂配置：i

①0.1M等渗磷酸盐缓冲液(pH6.85)：i取0.1M磷酸氢二钠490ml、i0.1M磷酸二氢钾510ml，l混匀，l调整pH至6.85。

②0.15M1NaCl溶液：i0.15M1NaCl溶液900m1中加入0.1M磷酸缓冲液(pH6.85)100ml，l混匀，l4℃保存，l可使用2个月。

③0.3M甘油溶液：i取纯甘油2.2ml，l放人100ml容量瓶中，l加人等渗磷酸盐缓冲液(pH6.85)30ml，l加蒸馏水至刻度，l4℃保存，l此试剂可使用1个月。

(3)方法：i取等渗磷酸盐缓冲液和甘油试剂，l置室温平衡30min。取平衡磷酸盐缓冲液5ml，l加20μl抗凝血，l制成红细胞悬液。将分光光度计预热20min后取0.11M等渗磷酸盐缓冲液3ml，l置于1cm比色杯中，l于波长625nm处调整零点。吸取0.3M甘油缓冲液2ml于另一比色杯中，l快速吸取1ml红细胞悬液加入甘油缓冲液中，l立刻开始计时，l快速混匀比色杯2次，l连续分别于10s、i30s、i50s、i70s、i90s、i110s、i130s、i150s、i3min、i5min、i10min、i20min、i30min读取光密度。

(4)参考值：iAGLT50：i>30min。

(5)注意事项：i空腹肝素抗凝血2ml，l配成球浆比例1：i1的红细胞悬液。如患者输血，l1个月内不能做本试验。温度对本试验影响较大，l适宜操作温度为25℃。温度过高或过低可分别造成假阳性或假阴性。防止试剂污染，l注意试剂使用时间。多余试剂应弃去，l不应倒回储藏瓶中。往甘油缓冲液中加入红细胞悬液时动作要快而准，l以保证10秒钟时读职并记录光密度值，l否则影响结果。

(6)临床意义：i对HS诊断价值最高。HS的AGLT50小于140秒，l即使是无临床症状或其他血液学异常的患者，lAGLT50也可阳性。其他溶贫均为阴性。