【病因】

PNH被认为是一种后天获得性疾病，l病因不明。现认为是由于某种因素的作用，l患者骨髓中的多功能造血于细胞PIG-A基因突变，l糖基磷脂酰肌醇(PIG)合成减少或缺失，lPNH细胞膜上与补体敏感性增高有关的十几种膜蛋白无法锚连在细胞膜上，l以CD55、iCD59最重要。CD55又称衰变加速因子(DAF)，l在朴体激活的C3、iC5转化酶水平起抑制作用；CD59可阻止液态的C9转变成膜攻击复合物。这些抑制补体活化的调节蛋白缺失导致细胞对补体过度敏感，l易被活化的补体破坏。这种异常不仅发生在红细胞上，l粒细胞、i单核细胞、i淋巴细胞均可累及，l提示PNH是一种造血干细胞水平上的基因突变。临床以与睡眠有关的、i间歇发作的血红蛋白尿为特征，l可伴全血细胞减少或反复血栓形成。患者体内红细胞有两群，l一群是正常的红细胞，l另一群对补体超敏，l后者数量的多少决定了临床表现及血红蛋白尿的发作频率。

【血象】

几乎所有患者都有贫血。有典型血红蛋白尿发作的多比较严重，l血红蛋白常低于60g／L。如发作频繁，l铁丢失过多，l可呈小细胞低色素性贫血。还可表现为大细胞性或正细胞性贫血，l但大细胞性多见。看不到球形或其他异常形态的红细胞。著合并血管内凝血可见到红细胞碎片。嗜多染红细胞、i幼稚红细胞也可见到。网织红细胞百分比往往升高，l但绝对值往往低于相同溶血程度的其他溶贫患者，l预示着骨髓造血功能可能减低。白细胞、i血小板常减少。约有半数患者两系或三系细胞减少。无血红蛋白尿发作的患者贫血可以很轻微。

【骨髓象】

增生多为明显烽跃或极度活跃。半数以上患者骨髓呈三系明显增生，l以红细胞系统尤甚。全血细胞明显减少时增生可减低，l但有核红细胞构成比往往不低，l多在30％以上，l可与再障鉴别。另有部分患者骨髓三系细胞均可见到病态造血，l需与骨髓增生异常综合征鉴别。

【蔗糖溶血实验】

(1)原理：iPNH患者的红细胞膜有缺陷，l对补体较敏感，l在少量血清存在时，l蔗糖发酵产酸，l改变了氢离子强度，l补体与红细胞膜结合增强，l导致红细胞膜形成小孔，l发生溶血。

(2)方法；肝素抗凝静脉血2ml。将900μl110％蔗糖溶液与100μl病人全血37℃解育60min，l随时振播。2000rpm离心10mln。上清液溶血为阳性，l否则为阴性。

(3)参考值：i正常人不会发生溶血。

(4)临床意义：iPNH患者常为阳性反应。本试验较敏感，l但不特异，l部分再障、i巨幼细胞性贫血、i自身免疫性溶贫、iHS等患者均可轻度阳性，l故只作为PNH的筛查试验。

(5)注意事项：i试剂应新鲜、i清亮。宜用新鲜血液，l不用陈旧血。严重黄疸者建议洗涤红细胞3次，l配成50％悬液，l以利结果观察。大量输血或溶血可导致假阴性。

【酸溶血试验(Ham’s1test)】

(1)原理；正常红细胞在弱酸性(pH6.6～6.8)的同源血清中干37℃孵育1小时不发生溶血。PNH患者红细胞对补体超敏，l在同样条件下可发生溶血。如先破坏血清中的补体，l则不会发生溶血。

(2)方法：i0.5ml枸橼酸钠抗凝血生理盐水洗涤3次，l最后配成50％的红细胞悬液。按下表加入试剂；

轻轻混匀，l37℃水浴孵育60分钟，l离心，l观察上清有无溶血。

(3)正常人不会发生溶血。

(4)临床意义：iPNH患者常为用性，l且特异性高，l假阳性少，l可作为本病的诊断依据。

(5)注意事项：i试验管加人盐酸后，l管口必须密封，l以使pH稳定。反复输血或对补体超敏的红细胞不多时可为弱阳性或阴性。EDTE、i肝素影响溶血，l不宜用作抗凝剂。HS、i自身免疫性溶贫标本会出现假阳性，l但正常血清灭活后仍为阳性，l可资鉴别。

【尿含铁血黄素定性试验(Rous’test)】

(1)原理；尿中的古铁血黄素是铁蛋白的多聚体，l呈棕色，l不稳定，l其中的高铁离子(Fe3+)可与亚铁氰化钾作用，l在酸性溶液中生成兰色的亚铁氰化铁复合物，l此即普鲁士蓝反应。

(2)方法：i新鲜尿液15ml混匀后21000rpm离心5分钟，l弃去上清。往尿沉渣中加入2％(w／v)亚铁氰化钾及3％盐酸各2ml，l混匀。2000rpm离心5分钟，l吸取管底沉淀加盖盖玻片后在高倍镜下观察结果。取正常人标本平行操作，l作为阴性对照。

(3)结果判断：i阳性颗粒为散在的或聚集的兰色、i有折光性的颗粒。

(4)临床意义：iPNH或其他血管内溶血时尿中可出现含铁血黄素。

(5)注意事项：i疾病初期肾小管上皮细胞还没有摄取血红蛋白，l古铁血黄素尚未形成，l本试验可为阴性。亚铁氰化钾溶液必须临用时现配。所用器材必须清洁，l经去铁处理，l不含铁离子，l否则会出现假阳性。

【蛇毒因子溶血试验】

(1)原理：i眼镜蛇蛇毒中含有一种毒性较低的蛋白质，l可直接激活补体C3，l并进一步激活其他补体成分，l使PNH的异常红细胞溶解、i破坏。

(2)方法；抗凝血1ml，l生理盐水洗涤3次后配成2％的红细胞悬液。按照下表加入试剂。

2000rpm离心5min，l用分光光度计于415μm处测定上清液光密度值。计算公式；

溶血度(％)=(OD1-OD2)／OD3×100％

(3)参考值：i正常人溶血度<5％，lPNH患者>10％。

(4)临床意义：i本试验为PNH的特异性诊断试验。PNHⅢ型红细胞对本试验最敏感，lⅡ型次之，lⅠ型最迟钝。溶血度数值与患者异常红细胞的数量呈正比。

(5)注意事项：i对照管OD值应在0.05附近，l不应超过0.10。标本要杜绝人为溶血。血清与红细胞要同型。蛇毒溶液4℃可保存2～3个月。如产生絮状沉淀，l离心后上清液仍可使用。