特发性血小板减少性紫癜(1diopathic1thrombocytopenic1pur-pura，lITP)是儿童常见的出血性疾病，l见于小儿各年龄阶段，l分急性(≤6个月)和慢性(>6个月)两型。多数患儿发病前1～6周有先驱急性病毒感染，l主要是上呼吸道感染、i风疹、i水痘、i麻疹、i流行性腮腺炎、i传染性肝炎、i传染性单核细胞增多症、i巨细胞病毒感染、i疫苗注射和化脓感染等。近年来研究表明本病发病与免疫机制有关，l因此认为应改称为免疫性血小板减少性紫癜(immune1throm-bocytopenic1purpura)。目前认为病毒感染引起ITP不是由于病毒的直接作用，l而是有免疫机制参与，l因为常在病毒感染后2～3周发病，l且大多数患者血清中存在血小板表面包被抗体(PAIgG)，l引起血小板被吞噬细胞所破坏。急性型比慢性型抗体量更高，l血小板破坏更多。

【血象】

血小板计数<100×109／L，l外周血细胞形态正常，l偶见大型血小板。严重长期失血可有失血性贫血血象。

【骨髓象】

巨核细胞增多或正常.巨核细胞分类可见原巨核细胞和幼稚巨核细胞正常或稍高，l成熟未释放型巨核细胞比例显著增加，l可达80％，l而成熟释放血小板的巨核细胞极少见。严重长期出血者可有失血性贫血骨髓象。

【流式细胞仪法检测血小板相关抗体】

ITP病人血小板表面IgG(PA1IgG)增高，l如同时检测PA1IgG、iPA1IgM、iPA1IgA可提高检测阳性率。此外还可测血清中血小板抗体。

【原理】

血小板表面的抗体(免疫球蛋白)在一定外界条件下，l可与相应的抗人免疫球蛋白抗体结合，l当抗人球蛋白抗体结合了荧光标记物后，l即可用流式细胞仪检测。

【标本要求】

病人需空腹，lEDTA抗凝；血小板低于201000／Ul.需双份取血。避免凝血及溶血。

【试剂】

1.P.B.S／EDTA／BSA缓冲液(EDTA-Na210.44g、iBSA10.5g加人到100ml1P.B.S中)

2.血小板抗体试剂盒，l包括GoatF(ab’)21Anti-Human1IgG(FcSD)-FITC、iGoatF(ab’)21Anti-Human1lgG(FcSp)-FITC、iGoatF(ab’)21Anti-Human1IgM(u)-FITC、iGoatF(ab’)21Anti-Hu-man1IgA(a)-FITC、iGoatF(ab’)21Anti-Human1Ig’s(Polyvalent)。FITC、iCD41-PE。

【方法】

1.标本混均，l离心800rpm，l15min，l将上清(富血小板血浆)转移到流式标准管中。

2.离心210001rpm，l3min，l弃血浆，lPBS洗血小板3次，l每次210001rpm，l3min。

3.PBS重悬，l血小板浓度为(5～10)×109／L。

4.每位病人取5只流式管，l编号：i①同型对照；②Ig’s;③IgG；④IgA；⑤IgM。每管加入标本100μl，l对照管加入对照10μl，l其他加10μl试剂，l每管均加入抗CD41单抗5μl混均，l室温，l避光115min。

5.用PBS洗1次，l21000rpm，l3min。

6.用1％多聚甲醛0.5ml，l固定，l放入冰箱待测。

7.流式细胞仪测定。

【参考值】

Ig's110％～25％；IgG<2％；IgM<2％；IgA<2％。

【临床意义】

血小板相关抗体是免疫性血小板减少性紫癜诊断、i疗效及评价效果的有用指标。在免疫性血小板减少性紫癜、i胶原性疾病中，l血小板相关抗体增高，l也有助于对其他疾病的免疫机制的研究，l如系统性红斑狼疮，l多发性骨髓瘤、iEven’s综合征等。

【其他检查】

出血时间延长、i血块收缩不良，l束臂试验阳性。用同位素51Cr或111In标记血小板输给ITP病人进行测定，l病人血小板寿命明显缩短。另外应用同位素体表计数法还可测出血小板阻留和破坏部位。