慢性粒细胞白血病(chronic1myelogenous1leukemia，lCML)是起源于骨髓多能干细胞的克隆性增殖性疾病。以粒系统增生为主，l男性多于女性，l各年龄均可发病。临床根据病情发展可分为三期：i慢性期、i加速期、i急变期。发病1～4年内有70％病人转变为加速期及急变期，l常规治疗不能延长生命。

【临床表现】

1.全身症状　起病慢，l乏力、i眩晕多汗、i食欲减退、i消瘦、i低热；

2.肝脾肿大　约半数病人有肝肿大，l少数病人可见脾肿大；由于肝脾肿大，l病人可出现压迫症状；

3.淋巴结肿大　50％的病人有中度淋巴结肿大。

【实验室检查】

1.外周血象　随病程进展呈正色素正细胞性贫血，l急变期呈严重贫血，l可见有核红细胞，l多染性红细胞和点彩红细胞，l白细胞显著升高，l初期为50×109／L，l多数在(100～300)×109／L，l部分病人可高达11000×1019／L，l各阶段中性粒细胞均明显增多，l以中性中幼粒及晚幼粒细胞增多尤为明显，l原始粒细胞低于10％，l嗜酸性及嗜碱性粒细胞易见，l可高达10％～20％是慢粒特征之一。单核细胞也可增多。血小板增多，l见于1／3～1／2初诊病人，l可超过11000×109／L，l加速期及急变期，l血小板可进行性减少。

2.骨髓象　骨髓颗粒增多、i黏稠、i涂片困难，l有时可干抽，l骨髓增生极度活跃。以粒细胞为主，l粒红比例明显增高，l可达10～50：i1。原始粒细胞及早幼粒细胞易见，l胞浆内偶见Auer小体，l原始粒细胞比值小于10％，l中性中幼粒、i晚幼粒、i杆状核粒细胞增多，l可见核浆发育不平衡现象。嗜酸性、i嗜碱性粒细胞增多。红细胞系统增生相对减少，l幼红细胞早期增生，l晚期受抑制。巨核细胞增多，l骨髓可发生轻度纤维化，l加速期及急变期，l原始细胞逐渐增多，l急变期红系统、i巨核细胞系统均受抑制。

3.遗传学及分子生物学检查　Phl染色体是CML的特征性异常染色体，l检出率可高达90％～95％，l大多数为t(9；22)(q34；q11)为典型易位。

4.中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP)测定

(1)原理：i

CaHPO4+Co(NO3)2→CoHPO4↓(置换反应)

CoHPO4+(NH4)2S→CoS↓(黑色或棕色)

(2)标本要求：i自细胞总数及中性粒细胞构成比均不能太低，l否则，l会计数不到一定数量的细胞，l对结果的准确性有较大影响。

(3)试剂：iβ-甘油磷酸钠、i巴比妥钠、i无水氯化钙、i硫酸镁、i硫化氨、i95％乙醇、i硝酸钴、i伊红。

(4)试剂配置：i

①3％β-甘油磷酸钠：i1.5g加蒸馏水至50m]

②2％巴比妥钠：i11111.0g加蒸馏水至50ml

③2％氯化钙：i11111.0g加蒸馏水至50ml

④2％硫酸镁：i11110.2g加蒸馏水至10ml

⑤1％硫化氨；11110.5ml加蒸馏水至50ml(用时配置)

⑥2％硝酸钴：i11111.0g加蒸馏水至50ml

⑦0.5％伊红：i0.25g加蒸馏水至50ml

⑧基质液：i①液5ml、i②液5ml、i蒸馏水10ml、i③液10ml、i④液1ml混匀，l此液要临时配置。

(5)操作步骤：i

①标本放入95％乙醇中固定10min，l蒸馏水冲洗后晾干。

②放入基质液，l37℃保温孵育6～8h后蒸馏水冲洗晾干。

③故入2％硝酸钴溶液反应5min，l蒸馏水冲洗后晾干。

④放入1％硫化氨反应5min，l蒸馏水冲洗后晾干。

⑤将伊红染液滴于血膜上，l用毛细滴管使之均匀覆盖于血膜，l2mln后自来水冲洗晾干。

(6)质量控制：i每批检测标本均选择一张“正常”骨髓片平行染色，l做阳性对照。

(7)结果判断：i阳性反应为中性粒细胞胞浆中出现黑色或棕黑色沉淀。依阳性反应强弱分为5度；

0度11阴性反应　胞浆中无黑色或棕黑色物质沉淀，l积0分。

1度11弱阳性1111胞浆面积的1／4呈黑色或棕黑色颗粒沉淀；或是全部胞浆染成均匀浅棕色，l无颗粒，l积1分。

2度　反应较强　胞浆面积1／2呈黑色或棕黑色颗粒沉淀；全部胞浆染成均匀棕色，l无颗粒，l积2分。

3度　反应强11胞浆内充满黑色或棕黑色颗粒沉淀，l但颗粒之间有空隙，l或胞浆内3／4面积充满了致密的黑色颗粒沉淀，l积3分。

4度　反应最强　全部胞浆充满黑色或灰棕色物质沉淀，l呈团块状，l甚至覆盖于细胞核上，l积4分。

在油镜下连续计数100个中性粒细胞，l记录其阳性反应细胞所占的百分率即为阳性率，l同时按上述标准将每一个中性粒细胞计人相应的等级中，l得出各等级中的中性粒细胞频数之后，l用频数乘以各自的积分，l再相加求和即为积分值。

(8)参考值：i成人NAP阳性率10％～40％；积分值40～80分。由于各实验室条件不一，l参考值也有差异，l应建立自己实验室的参考值，l以上参考值仅供参考。

(9)临床意义：iNAP活性可因年龄、i性别、i应激状态、i月经周期、i妊娠及分娩等因素有一定的生理变化。在病理情况下，lNAP活性的变化常有助于某些疾病的诊断和鉴别诊断。

①感染性疾病：i急性化脓菌感染时NAP活性明显升高，l病毒性感染时其活性在正常范围或略减低。因此，lNAP染色有时可帮助细菌性感染与病毒性感染的鉴别。

②慢性粒细胞白血病的NAP活性明显减低，l积分值常为0；类白血病反应的NAP活性极度增高，l故可作为与慢性粒细胞白血病鉴别的一个重要指征。

③急性粒细胞白血病时NAP积分值减低；急性淋巴细胞白血病的NAP积分值多增高；急性单核细胞白血病时一般正常或减低，l故可作为急性白血病类型的鉴别方法之一。

④再生障碍性贫血时NAP活性增高}阵发性睡眠性血红蛋白尿时活性减低，l因此也可作为两者鉴别的参考。

⑤其他血液病：i恶性淋巴瘤、i慢性淋巴细胞白血病、i骨髓增殖性疾病，l真性红细胞增多症、i原发性血小板增多、i骨髓纤维化症等NAP活性中度增多。恶性组织细胞病NAP活性减低。

⑥腺垂体或肾上腺皮质功能亢进、i应甫肾上腺皮质激素、iACTH、i雌激素等NAP积分值可增高。