(一)肾上腺皮质激素测定
1.皮质醇
【测定方法】
化学发光法、i放免均相竞争法(RIA)、i高压液相色谱法。
实验前采血要求:i空腹过夜,l早晨8:i00、i下午4:i00采血;血清或肝素化血浆,l标本脂血、i溶血对结果有影响。
【正常参考值范围】
早晨8:i00血皮质醇138~635nmol/L(5~25μg/dl);下午血皮质醇约为上午测定值的1/2。
【结果判读】
观察皮质醇的昼夜分泌规律,l临床评估肾上腺功能状态,l可用于鉴别诊断:iAddision’s症,lCushing's症,l垂体功能减退等疾病。皮质醇基础值升高提示有Cushing's症的可能。
2.17-羟皮质类固醇(17-OH)
【测定方法】
盐酸苯肼比色法
测定需准确留取24h全部尿液。留取方法:i将1ml盐酸(防腐剂)倒入留尿的瓶中,l准确收集24h的尿液(清晨7时将第一次尿液排出弃去,l开始计时,l留取此后的每次全部尿液于瓶中,l直到第二天清晨7时再留一次尿在瓶中,l即为24h尿)。留尿前停服西药三日,l停服中药七日。禁食刺激性食物(洋葱等)及带色素食物和饮料(柑橘、i茄子、i巧克力等)。充分混匀全部尿液后留取50ml置试管中冷冻保存。
【正常参考值范围】
男:i8.3~27.6μmol/24h尿;女:i5.5~22.1μmol/24h尿。
【结果判读】
正常人24h117-OH排量<16.56μmol/24h(6mg/24h);肾上腺皮质功能亢进时17-OH排量增加;肾上腺皮质功能不全时17-OH排量减少。
3.17-酮虚质类固醇(17-KS)
【测定方法】
微柱法。
测定需准确留取24h全部尿液。留取方法同上。
【正常参考值范围】
女:i14~55μmol/24h尿;男;21~76μmol/24h尿。
【结果判读】
增高:i肾上腺皮质增生;减低;肾上腺皮质功能减退。
4.血17-羟孕酮(17α-OHP)
【测定方法】
竞争放射免疫分析法(RIA)。
实验前采血要求:i空腹过夜,l脂血、i溶血标本对结果有影响。当日不检测时,lEDTA试管冰冻,l注明收集时间。
【正常参考值范围】
单位:inmol/L。
卵泡期 0.01~0.03
黄体期 0.04~0.13
口服避孕药 0.004~0.03
1~6个月 0.03~0.06
6~12个月 0.01~0.02
1~13岁 0.002~0.05
【结果判读】
17α-OHP升高对肾上腺皮质功能亢进有诊断价值;晚发型肾上腺皮质增生患儿或多毛症女孩,l17α-OHP基础值升高,l如果用0.25mg1ACTH静脉滴注后30或60分钟采血观察,l17α-OHP可明显升高。对治疗中的肾上腺皮质增生患儿,l可起到调整药量的监控作用。
5.促肾上腺皮质激素ACTH
【测定方法】
化学发光法、i竞争放射免疫分析法(RIA)。
实验前采血要求:i全血采集后立即离心,l血浆-20℃保存。
【正常参考值范围】
10.11pmol/L。
【结果判读】
评估肾上腺皮质功能。可用来鉴别诊断Addi1sion’s症、iCushing’s症及垂体功能减退等疾病。
6.血管紧张素I(肾素活性)测定
【测定方法】
竞争放射免疫分析法(RIA)
实验前采血要求:i肘静脉取血5ml,l迅速注人放在冰水浴冷却的酶抑制剂抗凝管中,l摇匀,l即刻再放回冰水浴中冷却,l待离心时取出。1000转/min离心5min,l(最好在4℃离心)分离血浆。此操作应在15分钟内完成,l严重溶血不能用。
【正常参考值范围】
饮食状态 X±SD(μg/L?h)
普食 卧位 0.05~0.79
立位 0.93~6.56
低钠 卧位 0~7.14
立位 1.13~9.68
7.血管紧张素Ⅱ洲定
【测定方法】
竞争放射免疫分析法(RIA)
实验前采血要求:i肘静脉取血5ml,l迅速注人放在冰水浴冷却的酶抑制剂抗凝管中,l摇匀,l即刻再放回冰水浴中冷却,l待离心时取出,l严重溶血不能用。11000转/min离心5min,l(最好在4℃离心)分离血浆。此操作应在115分钟内完成。
【正常参考值范围】
单位:ing/L
普食 卧位 28.2~52.2
立位 55.5~115.3
低钠 卧位 40.6~91
立位 64.3~120.7
8.醛固酮测定
【测定方法】
竞争放射免疫分析法(RIA)
实验前采血要求:i11肝素抗凝,l严重溶血不能用
空腹取肘静脉血1111卧位:i早6:i00起床前静脉取血
立位:i起床后2小时静脉取血。
【正常参考值范围】
173.40~5548.601pmol/L
(以上由北京儿童医院放射免疫中心提供)
(二)肾上腺功能试验
1.ACTH兴奋试验:i
【试验原理】
ACTH是垂体分泌的促肾上腺皮质激素,l外源性的ACTH可以使肾上腺皮质激素分泌增加,l反之,l内源性ACTH减少或肾上腺皮质本身对ACTH的刺激缺乏应激反应,l则肾上腺皮质激素分泌减少。通常将皮质醇分泌量作为肾上腺皮质的细胞储备,l此试验通过血、i尿中皮质激素及其代谢产物、i嗜酸细胞的变化,l测定肾上腺皮质的细胞储备功能。
【试验方法】
方法①合成的ACTH125U,l8h内静脉滴注完毕;于用药前、i用药当天、i用药后1天各留24h尿测定17-羟皮质类固醇(17-OH)、i皮质醇(UFC)及17-酮皮质类固醇(17-KS)。于给药前、i中、i后,l测血嗜酸细胞计数。
正常反应:i17-OH:i升高3~7倍;UFC:i升高2~8倍;17-KS:i升高14~28μmol/24h;
血嗜酸细胞计数:i降低80%~90%。
过强反应;双侧肾上腺增生;
增高不明显:i肾上腺癌瘤。
方法②ACTH1250μg肌肉注射;用药前、i注射后30、i60min各取血测皮质醇。
正常反应:i皮质醇升高>0.2μmol/L
高峰值>0.5μmol/L
2.地塞来松抑制试验
【试验原理】
肾上腺皮质激素可以抑制垂体前叶分泌ACTH,l使ACTH分泌量减少,l从而使肾上腺皮质激素分泌减少。地塞米松作为肾上腺皮质激素不被代谢为17-OH,l而且代谢物在尿中排泄极微,l因此,l可以通过血浆皮质醇及尿17-OH的含量,l反映出地塞米松对肾上腺皮质功能的影响情况。
【试验方法】
试验前5日内,l停用一切肾上腺皮质激素及ACTH激素,l用药前留24小时尿测定17-OH为对照,l于用药后第2天、i停药第1天各留24h尿一次性测定尿游离皮质醇UFC和17-OH.
①小剂量地塞米松抑制试验:i地塞米松0.51mg每6h×2天,l用于鉴别肾上腺皮质功能亢进及肥胖病。
②大剂量地塞米松抑制试验:i地塞米松21mg每6h×2天,l用于鉴别肾上腺肿瘤和肾上腺增生。
【结果判读】
①小剂量地塞米松抑制试验时,l正常人及肥胖症服药后第二天尿游离皮质醇UFC排量减少,l一般<40μg/24h;17-OH也较对照值减少一半以/:i<12.4μmol/24h,l考虑为正常人及肥胖症患儿服用地塞米松后肾上腺皮质功能被抑制。
肾上腺皮质功能亢进时尿17-OH不减低或稍有降低,l一般>12.4μmol/24h,l尿皮质醇>40μg/24h。
当服用地塞米松后肾上腺皮质功能不被抑制,l即可开始进行大剂量地塞米松抑制试验。
②大剂量地塞米松抑制试验第二天尿17-OH比对照值降低1/2时,l考虑双侧肾上腺皮质增生皮质醇被抑制,l病因来自垂体;
如果尿17-OH仍无变化,l应考虑自主性分泌皮质醇,l不受垂体ACTH的控制,l多见于肾上腺皮质肿瘤;
尿17-OH无变化还可见于异位ACTH分泌过多而导致肾上腺功能亢进;
患儿先天性肾上腺皮质增生女假两性畸形尿17-酮类固醇排泄量明显增加,l小剂量地塞米松抑制后,l尿中雄激素代谢产物排泄降低,l尿17-酮类固醇减少;肾上腺肿瘤引起的男性化患儿,l即便大剂量地塞米松抑制尿17-酮类固醇也无明显降低。