组胺为哮喘的主要炎性介质，l可刺激支气管平滑肌收缩，l并能增加微血管的通透性，l乙酰甲胆碱是神经介质乙酰胆碱的合成衍生物，l能与支气管平滑肌上的胆碱能受体结合，l刺激平滑肌收缩。平滑肌对这两种试剂相同剂量的刺激，l反应程度是一致的，l但在某些情况下，l也不完全相同，l轻度慢性阻塞性肺疾病患者，l对组胺的反应强于乙酰甲胆碱，l支气管哮喘患者对二者的反应相同，l在使用较大剂量时，l乙酰甲胆碱的不良反应较组胺小。
【适应证】
1.除外或确定哮喘的诊断。对现有哮喘样症状的患者，l常规肺功能正常或接近正常，l用其他方法不能确定有无哮喘，l此试验阴性，l可除外哮喘。
有些哮喘患者症状不典型，l以咳嗽或胸闷为主，l常规肺功能正常，l本试验阳性，l在除外其他可引起类似症状的原因以后，l可确定为咳嗽变异型哮喘。
2.有助于职业性哮喘的诊断。职业性哮喘是在工作场所接触某种过敏原而致的哮喘，l离开工作后，l肺功能可以正常，l本试验阳性有助诊断。
3.可用于哮喘的流行病学调查和哮喘发病机制的研究。
4.评价哮喘药物的疗效。
【禁忌证】
1.FEV1＜70％预计值。
2.近期心肌梗死或脑血管意外。
3.未经控制的高血压。
4.主动脉瘤。
5.上呼吸道感染(＜2周)。
6.妊娠。
7.哮喘发作期。
【操作方法】
1.受试者应具备的条件
(1)试验前FEV1≥70％预计值。
(2)停用茶碱类、iβ2受体激动药、i抗胆碱药物及吸入糖皮质激素12h，l停止口服糖皮质激素48h，l停用抗组胺药物48h。
(3)能配合操作。
(4)符合适应证的要求，l并无禁忌证的患者。
2.试剂的配制与保存11磷酸组胺与乙酰甲胆碱为干燥的晶体，l用前以生理盐水配成水溶液，l冰箱4℃下保存，l可用3个月。因乙酰甲胆碱结晶嗜水性很强，l原装开封后应立即称量，l配成水溶液。
组胺和乙酰甲胆碱可配成以下浓度的溶液(mg／m1)备用：i0.03、i0.06、i0.125、i10.25、i0.50、i1.00、i2.00、i4.00、i8.00、i16.00、i32.00。容器上应标明浓度与配制时间，l于冰箱内保存，l试验前30min从冰箱取出，l以使溶液温度达到室温，l温度过低，l会影响雾化量。
3.雾化装置11雾化器的质量应达到要求，l装入的溶液雾化后，l排出的颗粒直径大小应＜5μm。
因气源的压力与流速影响雾化器的排出量，l从而影响吸入药物的浓度，l每个新雾化器在使用前都应校对排出量。
雾化器排出量的标准化方法：i雾化器一端与压缩气源相连，l另一端与面罩或口件相连，l压缩气的压力应为3.51kg／cm2，l压缩气的流速则以使雾化排出量为0.131ml／min时的流速为准。
雾化排出量的测定方法：i雾化器内装生理盐水31ml，l称重，l调节压缩气流速为71L／min，l雾化2min，l再称重。
排出量(ml／min)＝雾化前重量(mg)－雾化后重量(mg)／雾化时间(min)／11000mg(每毫升生理盐水重1gm，l1gm＝11000mg)。
按以上方法重复测定3次，l计算平均值。调节流速为8L、i9L，l同样方法测定各流速下的平均值(某些雾化器容量较小，l则调节流速为4L，l5L，l6L)。以排出量为纵坐标，l以流速为横坐标作图，l求得排出量为0.13ml／min时的流速，l以后使用同样的雾化器，l同样的流速，l就不必再经常测定排出量。
4.吸入方法
(1)潮气法
①采用Wright或Devilbiss1NO1646雾化器，l压缩空气为动力源，l压缩气压力3.5kg／cm2，l流速5L／min，l雾化器内装生理盐水、i组胺或乙酰甲胆碱生理盐水溶液31ml。
②组胺或乙酰甲胆碱浓度0.03～16mg／ml，l成倍递增。
③测定步骤：ia.受试者休息15min，l取坐位，l夹鼻，l测定FEV12次，l取高值作为基础值。b.先吸生理盐水，l戴有孔的面罩或衔口件，l与雾化器连接，l打开气源，l开始雾化，l雾化器须直立，l否则影响雾化量，l以自然频率潮气呼吸2min后停止，l其后30s、i60s各做FEV11次，l如果FEVl最高值比FEV1基础值降低10％或更多，l则吸入药物浓度应从低剂量0.03mg／min开始，l不能简化。所有FEV1测定时间应在3min内完成。c.吸人药物，l方法同上，l从低剂量开始，l成倍递增，l每次吸人后30s、i60s各测定FEV11次，l取高值，l相邻两个剂量开始吸入间隔时间为5min，l直至1FEV1下降值≥20％FEV。基础值或吸人最高浓度为止。d.试验结束后，l吸入β-受体激动药2喷。e.试验结果的计算。气道高反应性的阈值以PC20FEV1或PD201FEV1表示，l简称PC20、iPD20，lPC20是在FEVl下降值＝20％FEV1基础值时的药物激发浓度，lPD20是在FEV1下降值＝20％FEV1基础值时的药物激发累计剂量。
PC20＝反对数[logCl＋(109C2—logC1)(20—R1)／(R2—R1)]
C2＝吸人的最后药物浓度
C1＝倒数第2个药物浓度
R1＝C1时FEV1下降的百分率
R2＝C2时FEV1下降的百分率
在雾化排出量为0.13ml／min的条件下，lPC20＜8mg／ml为反应性增高。
(2)计量法
①采用Devilbiss1NO140雾化器，l以生理盐水对其雾化排出量进行校准，l每喷平均排出量为0.0031ml，l每次试验用5个雾化器，l分别加入生理盐水和4级不同浓度的激发药物。
②组胺或乙酰甲胆碱生理盐水溶液浓度为50、i25、i6.25和3.125mg／ml，l药物吸入顺序和剂量见表11—1。
表11—l药物吸入顺序和剂量
③测定步骤：ia.受试者休息15min，l测定基础FEV12次，l取其高值；b.将雾化器口含管放在上下牙之间，l闭唇，l夹鼻夹，l先吸生理盐水，l平静呼吸3次，l然后由功能残气量(FRC)位开始缓慢吸气1～2s至肺总量(TLC)位，l屏气3s后再呼气，l开始缓慢吸气时由试者手捏雾化器皮球，l给予生理盐水一喷，l60s后测FEV12次，l差值须<100ml，l取其高值；C.按表11—1依次顺序吸人药物，l方法同上，l吸完每一剂量后测FEV1，l然后立即再吸下一个剂量，l直至FEV1较吸生理盐水后FEV1降低量≥20％，l或达到最高剂量，l终止试验，l吸入支气管扩张药；d.受试者无哮喘史，l吸入第1、i2剂量后无反应或FEV1下降不到10％者，l可以缩短试验过程，l第3、i4或5、i6剂量，l连续吸人3喷量；e.气道反应性指标：i气道反应性增高以PD20FEV1表示，l当1FEV1降低值达到基础FEV1值20％时吸入药物的累计剂量称为PD20FEV1，l当1His1PD201FEV1＜7.8／μmol或Mch1PD201FEV1＜12.8μmol为气道反应性增高。
PD20FEV1是以吸入药物的分子数量(m01)作为计算单位，l计算方法是以吸入药物的容积(m1)乘以该吸入药物的浓度，l再除以该药物的分子质量。例如一次吸人磷酸组胺容积为0.003ml，l其浓度为6mg／ml，l则一次吸入磷酸组胺量为10.003ml×6mg／ml＝0.018mg，l磷酸组胺的分子质量为308，l0.018mg／308＝0.00006mmol＝0.06μmol，l氯化乙酰甲胆碱的分子质量为195.7，l计算其PD20FEVl，l方法同上。
(3)阻力法：i近年来应用较多的是日本Chest厂生产的Astograph1TCK-6100H测定仪，l其原理是通过强制振动法测定呼吸系统阻力(Rrs)，l以其作为气道反应性的指标。
Astograph1TCK-6100H测定仪有12个雾化器，l第一个雾化器盛生理盐水，l第2～11个盛激发药物，l第12个盛放支气管扩张药，l各为2ml，l激发药物为乙酰甲胆碱时，l其浓度由低至高为49μg／ml、i98μg／ml、i195μg／ml、i390μg／ml、i781μg／ml、i11563μg／ml、i31125μg／ml、i61250μg／ml、i121500μg／ml与251000μg／ml。
测定时受试者坐位夹鼻，l咬口器，l连续做潮气呼吸，l仪器启动后即有雾化剂吸入，l先吸生理盐水，l以后每种浓度的雾化剂吸入1min，l即自动转入下一个剂量，l并自动描记出剂量反应曲线。吸人生理盐水后测得的Rrs为对照值，l吸人药物后的1Rrs比对照值增加2倍时吸人药物的累计剂量，l定为气道高反应性的阈值，l代表气道反应的敏感性，l曲线上升的坡度，l代表反应性的高低。此外也可以气道传导率(Grs)作为气道反应性的指标，lGrs＝1／Rrs，l在剂量反应曲线的坐标图上可划出1Grs曲线，lGrs由代表对照值的水平线开始下降时的拐点为Dmin，l为气道高反应性的阈值，l代表达到此阈值时最小的乙酰甲胆碱剂量，l表示气道反应的敏感性，l1Grs下降的坡度SGrs代表反应性的高低，lSGrs＝ΔGrs／Δt，lt为时间，l单位为分钟(min)。剂量的计算单位为：i潮气呼吸时，l吸人1mg／ml浓度的雾化溶液1min＝1U。正常人在吸入上述范围浓度的溶液时，l即使达到最高浓度，l也不起反应，l可与气道高反应者区别开来。
【注意事项】
1.组胺与乙酰甲胆碱激发试验虽然比较安全，l但仍然存在着潜在的危险性，l因此应掌握适应证与禁忌证，l并严格按照操作规范行事，l实施操作的技术员，l必须熟悉操作规范，l检查室内应备有支气管扩张药、i氧气等急救药品。
2.药物试验的正常值与异常值可能会有重叠，l看待试验结果，l不应过于机械，l1HisPC20或MchPC20≤4mg，l则诊断的可靠性很大，l当其＞4mg，l≤16mg时，l在此范围内有可能出现假阳性或假阴性，l如果可疑哮喘患者，l符合哮喘的临床表现越多，l即使PC20值偏大，l但诊断的可靠性则增加。