用以检测患者血清中的某种特异抗体或自身抗体。反应中有两对抗原抗体相继发生结合反应，l第一抗体与抗原是相对应的特异结合，l而第二抗体(即荧光素标记抗体)则是针对第一抗体的抗抗体。

【适应证】

1.血清中各种抗微生物抗体的测定，l可用于感染性疾病的病原学诊断，l如梅毒螺旋体、i支原体、i衣原体、i立克次体、i疱疹病毒等。

2.血清中各种自身抗体的测定，l可用于结缔组织病、i大疱性皮肤病和其他自身免疫病的诊断。

(1)系统性红斑狼疮、i皮肌炎、i硬皮病、i类风湿关节炎、i混合结缔组织病、i干燥综合征等：i有不同类型的抗核抗体。

(2)大疱性皮肤病：i如抗天疱疮抗体等。

(3)糖尿病：i抗胰岛细胞抗体等。

【禁忌证】

无特殊禁忌。

【操作方法及程序】

1.抽取患者血液，l分离出血清。

2.将该血清与含有相关抗原的标本共同孵育，l使第一抗体与抗原相结合。

3.加入荧光素标记的第二抗体与抗自身抗体或抗病原体抗体结合，l共同孵育。

4.在荧光显微镜下观察标本，l如果出现荧光反应即为阳性。

【注意事项】

1.血清中抗体、i第二抗体和抗原的浓度之比应适宜，l必要时予以适当稀释。若采用组织抗原标本，l则应尽可能暴露该抗原。

2.余同直接免疫荧光检查。