【适应证】
淋病。
【禁忌证】
无特殊禁忌。
【操作方法及程序】
1.分泌物的涂片检查11主要适用于男性。
(1)用灭菌生理盐水洗净尿道口。
(2)戴消毒手套后,l用手指由阴茎根部向尿道口方向挤出脓液,l用接种环或棉拭子蘸取脓液,l轻轻涂于载玻片上,l待其自然干燥后加热固定,l做革兰染色,l然后镜检。
(3)在多形核白细胞内找到革兰阴性的肾形双球菌时,l可明确诊断。
2.淋球茵的分离培养
(1)取材。
①男性患者从尿道取材时,l可用细小棉拭子伸入尿道2~4cm,l轻轻转动后取出分泌物(应略带黏膜)。
②女性患者取材时,l先用阴道窥器暴露宫颈口,l用无菌棉拭子拭去宫颈口表面的分泌物,l另取一棉拭子插入宫颈口内1~2cm,l转动并停留1O~20s取出。
③直肠取材时,l应将棉拭子插入肛门2~3cm。
④检查淋球菌性咽炎时,l应从扁桃体及扁桃体窝取材。
⑤对青春期前女童可采集阴道处分泌物标本。
(2)标本取出后立即接种于培养基中,l目前常用加入多黏菌素的血液琼脂或巧克力琼脂培养基。
(3)初次分离应使用5%~10%C02烛缸,l培养温度以36℃为宜,l相对湿度80%以上,l培养24~48h看结果。
(4)淋球菌在多黏菌素B血液琼脂上经24~48h培养后,l可形成圆形、i凸起、i湿润、i光滑、i半透明或灰白色的菌落,l边缘呈花瓣状,l直径0.5~1.0cm,l用接种环触之有黏性,l如继续培养,l菌落体积增大,l表面粗糙,l边缘皱缩。
3.淋球菌的鉴定——氧化酶试验
(1)配制氧化酶试剂:i0.5%~1%盐酸二甲基对苯二胺水溶液。
(2)将溶液滴加于可疑菌落上,l观察颜色变化。也可先将试剂滴在一小张滤纸片上,l然后挑取可疑菌落与之接触,l观察颜色变化。
(3)菌落在接触氧化酶试剂15~20s出现红色,l保持30s以上,l然后逐渐变成紫色,l最后呈黑色,l为氧化酶试验阳性,l证实为淋球菌。
【注意事项】
1.分泌物涂片时不要用力涂擦,l以免细胞破裂和变形,l涂片厚薄要合适。
2.女性宫颈分泌物、i咽和直肠标本在涂片中由于杂菌较多,l故推荐用培养法。
3.分离培养取材时拭子伸入尿道或宫颈的深度一定要足够。
4.培养淋球菌时,l取材后应立即接种,l标本离体的时间越短越好。
5.分离培养应采用加抗生素的选择性培养基。
6.氧化酶试剂应为新鲜配制(现用现配),l在棕色瓶中避光保存。
7.氧化酶试剂遇铁也会变红,l故接种环应非铁丝所制。
8.对症状不典型的男性患者取材,l最好在其晨起排尿前或排尿4h以后。