1.凡需要进行病理组织学检查的标本(器官或组织)，l离体(活体或尸体)后，l应尽快置放(浸泡)于装有足够量固定液的容器中固定。固定液量应为被固定标本体积的5～l0倍。置放标本的容器大小视标本和固定液的体积而定，l应适当大一些。临床科室切取的标本置放于容器中固定后，l应尽快送交病理科继续固定。未能及时、i充分固定的干涸或腐败标本不能再进行固定和用于制作切片。

2.常规固定液为4％中性甲醛(10％中性福尔马林)。应预先多量配制贮存，l以备随时使用。小标本的固定时间为4～6h，l大标本为18～24h或更久。

3.根据病理学特殊检查(特殊染色和组织化学染色、i免疫组织化学染色和原位核酸分子杂交染色、i电镜观察等)的需要，l应选用其他适宜的固定液进行固定。[参见后文“7.常用固定液。”]

4.器官、i组织固定的基本方法可参见本章第四节“病理标本的肉眼检查和组织学切片取材技术”。

(1)食管、i胃、i肠、i胆囊、i膀胱等空腔器官：i依规范方法剪开后，l按其自然状态平铺于硬纸板上(重点暴露黏膜面或内表面的病变处)，l并用大头针将标本边缘处固定于纸板上，l然后放入4％中性甲醛中固定(黏膜面或内表面朝向容器的液面，l并覆盖薄层脱脂棉)。

(2)肝、i脾：i由器官背面，l沿其长轴每间隔1.5～2.0cm纵向平行剖开，l切成数片。将每片肝或脾轻轻地平放于装有4％中性甲醛的容器中，l容器底面衬以脱脂棉。应避免标本弯曲和相互间的叠压。

(3)肺叶：i放入固定液中的肺叶漂浮于液面，l须在肺表面覆盖浸含固定液的薄层脱脂棉。必要时从支气管注入适量4％中性甲醛。

(4)肾：i沿肾外缘中线朝肾门方向做一水平切面(深达于肾盏)，l再行固定。

(5)淋巴结：i先用4％中性甲醛固定1h后，l再沿其长轴切开(肿大的淋巴结可切成数片.厚2～3mm)，l继续固定。

(6)骨组织：i先锯成小片(若是长骨应做横向锯片)，l在4％中性甲醛中固定24h后，l再进行脱钙。

(7)微小组织或液体沉淀物：i先用拭纸或滤纸妥为包裹(须用大头针扎牢)，l然后放人专用小盒内进行4％中性甲醛固定，l以防检材遗失。

凡进入固定程序的标本必须连带其正确无误的病理检验号(病理号)。

5.多数固定液对人体有害，l需要防护，l必须在封闭的通风条件下进行操作。

6.组织块的切取和固定。

(1)由较大标本切取用于制作切片的组织块(取材)时，l应与标本的断面平行，l组织块厚度一般为0.31cm(不应＞0.5cm)，l面积一般在(1～1.5)cm×(1～1.5)1cm。

(2)切取组织块的形状，l在充分包括肉眼所见病变的前提下尽量规则些(例如方形、i矩形、i三角形等)；由一个标本切取的多块组织的形状有所不同，l便于蜡块与其相应切片的核对。

(3)固定组织块的固定液量，l一般应为组织块总体积的5～10倍以上。

(4)室内常温(25℃左右)下的固定时间为3～24h；低温(4℃)下的固定时间应延长。

(5)固定组织块的容器要大一些。

(6)组织块固定期间需要间断地轻摇或搅动固定液以利于固定液的渗入。

7.常用固定液。

(1)4％中性甲醛(10％中性福尔马林)固定液：i

甲醛(40％)111111111001ml

无水磷酸氢二钠11116.5g

磷酸二氢钠111111114.0g

蒸馏水111111111111900ml

(2)乙醇一甲醛(酒精一福尔马林，lAF)固定液：i

甲醛(40％)1111100ml

95％乙醇1111900ml

[说明]一般组织块经乙醇一甲醛固定1～2h后，l即可移入95％乙醇内脱水。

(3)Carnoy固定液：i

无水乙醇111160ml

氯仿1111111130ml

冰醋酸11111110ml

[说明]本液是组织化学染色的常用固定液，l组织经Carnoy液固定1～2h后，l即可移入95％乙醇中脱水。

(4)Zenker固定液：i

升汞11111111115.0g

重铬酸钾1111112.5g

硫酸钠111111111.0g

蒸馏水(加至)111100ml

[说明]配制本液时，l先将升汞溶于蒸馏水中，l加温至40～50。C溶解后，l再加入重铬酸钾，l最后加入硫酸钠，l贮存待用。使用前加入5m[冰醋酸，l混合。组织块需要固定12～24h。切片染色前，l需要进行脱汞沉淀处理。

(5)Bouin固定液：i

饱和苦味酸水溶液(约1.22％)1111175ml

甲醛(40％)111111111111111111111125m1

冰醋酸1111111111111111111111111115ml

[说明]本液临用时配制。组织块置于Bouin液固定12～24h即可(小块组织只需固定数小时)。经Bouin液固定的组织被苦味酸染成黄色，l可用水洗涤12h后进入乙醇脱水(兼脱色)。不必将组织中的黄色除净(残存于组织中的苦味酸无碍染色)。

(6)过碘酸一赖氨酸一多聚甲醛固定液(PLP)：i

A液：i赖氨酸11111111111111111111111111111.827g

蒸馏水111111111111111111111111111111150ml

0.1mol／L磷酸盐缓冲液(pH7.4)111111150ml

B液：i8％多聚甲醛水溶液11111111111111111111100ml

[说明]本液临用时配制：i取A液3份、iB液1份，l混合后，l加入过碘酸钠，l使液体终浓度为2％。组织块在4℃下固定36～54h。本液对细胞结构和抗原性保存较好。

(7)B5(醋酸钠一升汞一甲醛)固定液：i

无水醋酸钠11111.25g

升汞111111111116.0g

蒸馏水111111111190ml

[说明]将以上物质混合、i溶解，l使用前加入甲醛10ml。本液多用于固定淋巴组织。染色前应进行脱汞沉淀处理。如不加甲醛称为B4固定液(蒸馏水为100m1)。

(8)丙酮固定液：i冷丙酮(4℃)固定液用于酶组织化学染色。细胞标本的免疫组化染色也常用冷丙酮固定10min。