病理组织学诊断检材的制备技术:快速石蜡包埋组织切片的制备

(一)煮沸固定切片法

1.固定切取大小适宜(厚度<2mm)的组织块,l尽快置人装有5~8m114%中性甲醛的试管中煮沸lmin,l然后移入冷水中。

2.脱水

(1)将已经煮沸固定的组织块取出,l用刀片将其厚度修切至<1.5mm,l随即置入盛有5~81ml丙酮的试管中,l煮沸21min,l然后将丙酮倾弃。

(2)再向该试管中重新加入5~81ml丙酮并煮沸2min。如此重复3~4次。

3.浸蜡11将已经丙酮脱水的组织块由试管中取出,l用吸水纸去除其表面液体,l随即置人75~80℃熔化的石蜡中,l待组织块下沉、i不再出现气泡时(约需30s),l即可包埋。

4.包埋、i切片和染色

(1)用热镊子将预制的蜡块表面熔化,l埋入已经浸蜡的组织块。

(2)待埋入组织块的蜡块表面凝固后,l即用载玻片轻压蜡块表面片刻,l使蜡块表面平整。

(3)将蜡块置入冰水中,l使其变硬。

(4)迅速切片,l裱片后用吸水纸去除载玻片上的水分。

(5)将载玻片用火焰烘干(勿距火焰太近)。

(6)迅速进行HE染色。

5.注意事项

(1)为了尽量缩短制片时间,l必须预先做好有关准备工作,l备齐取材用具、i试管、i固定液、i丙酮、i酒精灯、i火柴(或其他引火器)、i包埋用蜡块、i载玻片和染色试剂等,l放在固定部位待用。

(2)全部制片过程一般在20~25min内完成。

(3)制片后剩余组织块应做常规石蜡包埋切片染色,l进一步诊断。

(4)含脂肪较多的组织,l须经多次丙酮处理。

(5)用于组织固定、i脱水、i透明的试剂和浸蜡用的石蜡应及时过滤、i更换。

(6)丙酮、i乙醇、i二甲苯等为易燃物,l进行上述各项流程时,l2m距离内不得存在明火。加温脱水和浸蜡过程必须应用隔水温箱,l不得使用干烤箱操作。

(二)超声波快速处理仪石蜡切片法

参照有关厂商的说明书操作。