骨和其他钙化组织,l通常需要脱去钙盐后进行切片。骨组织脱钙前须先行固定。
(一)常规脱钙法
1.将骨组织锯成薄片(约lcm×1cm×0.3cm)。
2.在AF中或4%中性甲醛中固定6~12h。
3.将骨片置于5%硝酸(急需时可置于37℃温箱)中脱钙,l至用针轻刺可进入时为止,l需12~24h(小块骨组织脱钙仅需2~3h),l其间可更新脱钙液2~3次。
4.流水冲洗1~2h。
5.移入5%甲明矾液,l2~4h。
6.流水冲洗2~3h。
7.按常规脱水。
8.石蜡包埋。
(二)电解脱钙法
将骨片置于装有8%硝酸和10%甲酸混合液的电泳槽(有盖的方形玻璃标本缸或烧杯)内的阳极处,l6V直流电源下持续电解30min至3h,l至用针轻刺可入时为止。
(三)骨髓组织脱钙
可浸泡于苦味酸乙醇饱和液(占85%)、i甲醛(占10%)和冰醋酸(占5%)的混合液中(同时进行固定和脱钙)。
(四)注意事项
1.骨片等脱钙组织的厚度适宜。
2.脱钙组织与脱钙液的体积比>l:i30。
3.脱钙过程中应不时摇动,l多次更换脱钙液。
4.脱钙时间不可过长。
5.微波处理可加速脱钙过程。1111、i
6.脱钙后的组织必须用流水充分冲洗。
7.用于包埋的石蜡硬度适中(不要过软或过硬)。