细胞学诊断检材的制备技术:细胞涂片、组织印片和压片+的制备
(一)涂片质量的基本要求
1.将检材涂布于载玻片的右(或左)2/3处,l另1/3部位粘贴标签。
2.单向涂布检材,l避免细胞变形。
3.均匀涂布检材,l涂片厚薄适当。
4.红细胞过多的涂片,l可酌情进行溶解红细胞处理。
(二)涂片方法
1.涂抹法用棉签或针头将标本单向、i均匀地涂抹于载玻片上。
2.拉片法11将一滴检材置于一张载玻片上,l再用另一张载玻片叠加其上并予轻压,l再将该两张载玻片朝反向拉动,l从而获得两张涂片。
3.推片法将一滴检液置于载玻片的右端,l再用另一张窄边光滑的载玻片作为推片,l并以与滴液载玻片成40°夹角、i自右向左匀力推动检液,l形成涂片。
(三)痰涂片的制作
1.送检的痰液应是由肺内咳出,l最好是清晨空腹时自肺内深咳出的痰液。
2.核查无误的收验痰液,l应立即制作涂片(通常为2~3张)。
3.用细签或无钩镊子挑取痰液置于载玻片上,l并左右往复薄涂,l随即投入固定液中。
4.痰液中呈现下列性状的成分可能含有癌细胞,l应注意选取制作涂片;①血丝;②灰白色痰丝(形如白色细线,l微细螺旋状,l牵引时可伸长);③透明痰液(可拉成较长细丝)。同时,l应及时在细胞学检查申请单上记录痰液性状。
5.检查痰液中的肿瘤细胞,l一般应连续送检3次。
(四)黏膜、i皮肤表面刮取(刷取、i拉取)物和分泌物涂片的制作
1.阴道排出物、i子宫颈刮取物涂片11通常由妇产科医师将已制作、i固定后的涂片送交病理科检查(注意由子宫颈外口上皮移行带刮取细胞涂片)。
2.支气管镜、i胃镜等内镜的黏膜刷取物涂片(黏膜刷片)刷片通常由内镜医师制作、i固定后送交病理科检查。
3.食管、i胃拉网涂片11拉出的套网气囊适量放气后,l将气囊套网在载玻片滚动涂片,l尤应将套囊上血丝、i灰白色物制作涂片。涂片通常由有关临床医师将已制作、i固定后的刷片送交病理科检查。套网中的小块组织可用来制作石蜡包埋切片。
4.其他眼、i耳、i鼻、i咽、i口腔、i皮肤等处病变(溃疡性病变等)的分泌物通常由临床医师以涂抹法制片送检。
(五)液体涂片的制作
液体标本(检材)包括乳头溢液、i胸水、i腹水、i尿液、i胃液、i脑脊液、i穿刺液、i冲洗液、i灌注液等。除乳头溢液外,l其他液体检材一般均应先行离心(2000r/min,l10~20min))雷,l取其沉淀物制作涂片;液体检材也可用细胞涂片离心机(cytospin)直接制作细胞涂片。制作好的涂片应立即固定和染色。(及时在细胞学检查申请单上记录液体标本的性状和数量)
液体标本的离心沉淀物较多时,l将制作涂片后剩余的沉淀物固定于4%中性甲醛中1h,l然后用擦镜纸或绸布将其包裹,l制作石蜡包埋切片。
1.乳头溢液直接滴于载玻片上制作涂片。
(1)患者乳腺触及肿物时:i用手指自肿物远方沿乳腺导管引流方向轻力按摩挤压,l获取溢液,l宜取中段溢液和血性溢液做涂片。
(2)患者乳腺未触及肿物时:i可自乳晕周围向乳腺外周轻力按摩挤压,l获取溢液。
2.胸水和腹水
(1)由患者体内抽取的胸水或腹水应尽快送交病理科验收,l检液量以200~500ml为宜。因故(例如远途)延时送达时,l须在标本中加入40%的甲醛(加入量为送检胸水、i腹水量的1/5),l或加入等量的50%乙醇一生理盐水。
(2)胸水、i腹水的离心,l采取容器底部的液体10ml(包括可能存在的沉淀物),l移入离心管内进行离心。
(3)离心后,l倾去全部上清液,l将离心管底部含有沉淀物的液体摇匀并用吸管吸出适量,l滴注于载玻片上,l制作涂片。
3.尿液
(1)制作方法同胸、i腹水。
(2)尿液含有胶状物时,l应先将其除去。清除方法:i用0.5mmol/L氢氧化钠调节尿液pH至6.0;离心后,l倾去上清液,l再向沉淀物中加入95%乙醇5~10ml(固定细胞),l静置5min后加入蒸馏水并轻摇(溶去胶状物);再次离心后,l取沉淀物制作涂片。检查尿液中的肿瘤细胞,l一般应连续送检3次。
4.胃液、i胃冲洗液制作方法同胸、i腹水。
5.脑脊液
(1)制作方法同胸、i腹水。
(2)脑脊液内细胞一般较少,l可用微孔滤膜过滤法、i沉淀法或纤维捕捉法收集细胞,l制作涂片。
6.冲洗液、i灌洗液、i穿刺液涂片11制作方法同胸、i腹水。