(一)Van1Gieson(VG)苦味酸一酸性品红法
1.试剂配制
(1)Weigert铁苏木精染液:i
甲液:i苏木精11111111111111111g
无水乙醇11111111111100ml
乙液:i30%三氯化铁液11111114ml
蒸馏水1111111111111195ml
纯盐酸1111111111111111lml
甲、i乙两液须分瓶盛放,l甲液配制后数天即可用,l不宜配制过多,l保存时间过长时染色不良,l平时应密封保存;乙液配制后立即可用。临用前将甲、i乙两液等量混合。
(2)Van1Gieson染液:i
甲液:i1%酸性品红水溶液
乙液:i苦味酸饱和水溶液(约1.2%)
甲、i乙两液分瓶盛放。临用前取甲液1份、i乙液9份混合后使用。
(3)1%盐酸一乙醇
70%乙醇111199ml
纯盐酸11111111lml
2.染色程序
(1)组织缺固定于4%中性甲醛液中,l常规脱水、i石蜡包埋和切片:i
(2)切片脱蜡至水。
(3)用Weigert铁苏木精液染5~l0min。
(4)流水稍洗。
(5)1%盐酸-乙醇迅速分化。
(6)流水冲洗5~10min。
(7)用Van1Gieson液染1~2min。
(8)倾去染液,l直接用95%乙醇分化和脱水。
(9)无水乙醇脱水,l二甲苯透明,l中性树胶封固。
3.染色结果胶原纤维呈鲜红色,l肌纤维、i细胞质和红细胞呈黄色,l胞核呈蓝褐色。
(二)Masson三色法
1.试剂配制
(1)Weigert铁苏木精染液(参见上文“(一)Van1Gieson(VG)苦味酸一酸性品红法”)。
(2)丽春红酸性品红染液:i
丽春红 0.7g
酸性品红 0.3g
蒸馏水1111111111111111111199ml
冰醋酸
(3)1%磷钼酸水溶液:i
磷钼酸1111111111111111111111g
蒸馏水111111111111111111100ml
(4)2%苯胺蓝染液:i
苯胺蓝1111111111111111111112g
冰醋酸111111111111111111112ml
蒸馏水1111111111111111111198ml
2.染色程序
(1)组织块固定于4%中性甲醛液中。用Bouin液或Zenker液固定时,l流水冲洗组织块过夜,l效果更好。常规脱水、i石蜡包埋和切片。
(2)切片脱蜡至水。组织块经Zenker液固定时,l应对其切片进行除汞处理:i①切片脱蜡后,l以0.5%碘乙醇作用10min;②稍水洗;③以5%硫代硫酸钠作用5min;④流水冲洗10min。
(3)Weigert铁苏木精液染5~10min。
(4)流水稍洗。
(5)1%盐酸-乙醇分化。
(6)流水冲洗5~10min。
(7)丽春红酸性品红液染5~10min。
(8)蒸馏水稍洗。
(9)1%磷钼酸水溶液处理约5min。
(10)不用水洗,l直接用苯胺蓝液复染5min。
(11)0.2%冰醋酸处理lmin。
(12)95%乙醇脱水并洗去冰醋酸。
(13)无水乙醇脱水,l二甲苯透明,l中性树胶封固。
3.染色结果胶原纤维呈蓝色。细胞质、i肌纤维和红细胞呈红色,l胞核呈蓝褐色。