特殊染色和组织化学技术:弹力纤维染色

(一)醛品红法

1.试剂配制

(1)Lμgol碘液:i

碘片1111111g

碘化钾11112g

蒸馏水11l00ml

先取碘化钾溶于20ml蒸馏水中,l再加入碘片,l摇动至碘片溶解,l再把余下的蒸馏水加入。

(2)5%硫代硫酸钠水溶液:i

硫代硫酸钠111115g

蒸馏水1111111l00ml

(3)醛品红染液:i

碱性品红11110.5g

70%乙醇11111l00ml

浓盐酸111111111lml

三聚乙醛1111111lml

将碱性品红溶于70%乙醇,l然后加入浓盐酸和三聚乙醛,l轻轻摇动使混合均匀,l于室温下静置l~2天(室温低时需3~4d),l待变为深紫色即为成熟。过滤于小口砂塞瓶内,l置4℃冰箱内保存备用。

(4)橙黄G染液:i

橙黄G11112g

蒸馏水11l00ml

磷钨酸11115g

混合后稍摇动数分钟,l使尽量溶解,l静置一夜,l取上清液使用。

2.染色程序

(1)组织块固定于4%中性甲醛液中,l常规脱水、i石蜡包埋和切片。

(2)切片脱蜡至水。

(3)用Lμgol碘液处理5min。

(4)稍水洗。

(5)5%硫代硫酸钠液处理5min。

(6)流水冲洗5min。

(7)70%乙醇稍洗。

(8)醛品红液浸染l0min。

(9)70%乙醇浸洗2次,l每次约30s,l至切片不再脱色为止。

(10)稍水洗。

(11)橙黄G液滴染约1S。

(12)稍水洗。

(13)常规脱水、i透明,l中性树胶封固。

3.染色结果弹力纤维呈深紫色,l底色为不同程度的黄色。

(二)地衣红法

1.试剂配制

地衣红乙醇液:i

地衣红11111111lg

70%乙醇111199ml

浓盐酸11111111lml

将地衣红溶于70%乙醇,l然后加入浓盐酸,l放置1~2d后即可使用。

2.染色程序

(1)组织块固定于4%中性甲醛液中,l常规脱水、i石蜡包埋和切片。

(2)切片脱蜡至70%乙醇。

(3)地衣红乙醇液浸染3h。

(4)70%乙醇浸洗2次,l每次约30s,l至染液不脱出为止。

(5)95%乙醇、i无水乙醇脱水。

(6)二甲苯透明,l中性树胶封固。

3.染色结果弹力纤维呈深棕红色。