主要方法是磷钨酸苏木精法。

1.试剂配制

(1)磷钨酸苏木精液：i

苏木精111110.1g

蒸馏水111111l00ml

磷钨酸111111112g

取一烧杯盛蒸馏水30ml，l加入苏木精，l稍加温使苏木精完全溶解；再取另一烧杯盛余下的蒸馏水70ml，l加入磷钨酸使其完全溶解。待苏木精液冷后，l将其与磷钨酸液混合，l置于光亮处数周至数月，l待成熟后方可使用。

(2)酸化高锰酸钾液：i

甲液：i0.5％高锰酸钾水溶液

高锰酸钾111110.5g

蒸馏水11111111l00ml

乙液：i0.5％硫酸溶液

硫酸11111110.5ml

蒸馏水111199.5ml

甲、i乙两液分瓶盛装，l临用前等份混合后滴在切片上。

(3)2％草酸水溶液：i

草酸1111112g

蒸馏水11l00ml

(4)0.5％碘乙醇液：i

碘片11111110.59

70％乙醇11111l00ml

(5)5％硫代硫酸钠液：i

硫代硫酸钠11115g

蒸馏水11111100ml

2.染色程序

(1)组织块固定于Zenker液中，l而后流水冲洗一夜，l常规脱水、i石蜡包埋和切片。

(2)切片脱蜡至水后，l若已用中性4％甲醛液固定，l应把切片再置入Zenker液内，l于37℃温箱中处理3h或于室温下处理过夜。

(3)流水稍冲洗，l并进行除汞处理。除汞方法参见本节“一、i”项“(二)Masson三色法”。

(4)酸化高锰酸钾液作用5min。

(5)稍水洗。

(6)2％草酸液漂白1～3min。

(7)流水冲洗5min，l蒸馏水洗1次。

(8)入磷钨酸苏木精液染24～48h。

(9)取出后直接用95％乙醇迅速洗去多余染液。

(10)常规脱水、i透明，l中性树胶封固。

3.染色结果横纹肌纤维、i纤维素、i细胞核、i核仁和神经胶质纤维等呈蓝色；胶原纤维、i网状纤维、i软骨基质呈棕红色，l弹力纤维呈紫色。