主要方法是苯胺结晶紫法(改良的Gmm-Weigert法)。

1.试剂配制

(1)1％伊红液：i

伊红Y11111111g

蒸馏水1111100ml

(2)苯胺结晶紫染液：i

结晶紫111111112g

无水乙醇111110ml

苯胺1111111112ml

蒸馏水11111188ml

将结晶紫溶于无水乙醇，l将苯胺与蒸馏水盛于小口砂塞瓶内摇匀混合，l然后再与结晶紫无水乙醇混合。混合后的染液可保存数月，l使用前过滤。

(3)Weigert碘液：i

碘片111111111g

碘化钾1111112g

蒸馏水1111100ml

(4)苯胺二甲苯液：i

苯胺1111111份

二甲苯11111份

2.染色程序

(1)组织块固定于4％中性甲醛液中，l常规脱水、i石蜡包埋和切片。

(2)切片脱蜡至水。

(3)用明矾苏木精液浅染细胞核。

(4)流水冲洗10min。

(5)1％伊红液染色10min(于50℃温箱内)。

(6)稍水洗。

(7)用苯胺结晶紫液(应在切片上附加滤纸过滤)染色10min。

(8)倾去染液，l用滤纸稍吸干切片周围染液。

(9)用Weigert碘液直接滴在切片上，l约2min。

(10)稍水洗，l用滤纸彻底吸干水分。

(11)苯胺二甲苯进行分化，l并轻轻摇动切片，l必要时可更换新的分化液，l至无颜色脱出。立即倾去切片上的苯胺二甲苯。

(12)滴入新的二甲苯，l以除去苯胺，l然后在镜下观察，l至切片显示清晰为止。

(13)用二甲苯反复多次洗切片，l彻底把苯胺除去。

(14)用中性树胶封片。

3.染色结果革兰(Gmm)阳性细菌呈蓝紫色，l胞核蓝黑色，l其他组织呈粉红色.。