(一)硝酸银法
1.试剂配制
(1)醋酸缓冲液(pH3.6):i
0.2mol/L醋酸缓冲液(pH3.6)1110ml
蒸馏水111111111111111111111111240ml
(2)1%硝酸银液:i
硝酸银111111111111111111g
醋酸缓冲液(pH3.6)11100ml
(3)2%硝酸银液:i
硝酸银1111111111111110.2g
醋酸缓冲液(pH3.6)111110ml
(4)5%明胶液:i
明胶11111111111111111115g
醋酸缓冲液(pH3.6)11100ml
先把醋酸缓冲液加温至40℃左右,l然后加入明胶,l于37℃温箱内慢慢溶解。
(5)3%对苯二酚液:i
对苯二酚11111111111110.3g
醋酸缓冲液(pH3.6)111110ml
(6)明胶对苯二酚液:i
3%对苯二酚液11111lml
5%明胶液111111115ml
先把5%明胶液置于水浴中加温,l然后加入对苯二酚液,l混合后保存于56℃水浴箱中。
(7)显影液:i
明胶对苯二酚液11111116ml
2%硝酸银液11111111113ml
在下述“染色程序”第4步操作完成之前5min,l充分混合,l置于56℃水浴箱中保温待用。
2.染色程序
(1)组织块固定于4%中性甲醛液中,l常规脱水、i石蜡包埋和切片。
(2)切片脱蜡至水。
(3)醋酸缓冲液洗2次,l每次5~10s。
(4)将切片置入1%硝酸银液内,l于56℃水浴箱作用1h。
(5)取出切片,l不用水洗,l平放于染色架上,l立即倾入显影液(于第4步完成前5min配制),l显影2~3min,l至眼观切片呈金黄色或黄棕色为止。
(6)倾去显影液,l于56℃自来水中浸洗1~2min。
(7)稍水洗。
(8)常规脱水、i透明,l中性树胶封固。
3.结果11胃幽门螺杆菌呈棕黑至黑色,l组织呈灰黄至黄棕色。
(二)硼酸亚甲蓝法
1.试剂配制
硼酸亚甲蓝液:i
硼酸1111110.5g
亚甲蓝11110.5g
蒸馏水1111100ml
先用蒸馏水溶解硼酸,l然后再溶解亚甲蓝。
2.染色程序
(1)组织块固定于4%中性甲醛液中,l常规脱水、i石蜡包埋和切片。
(2)切片脱蜡至水。
(3)滴加硼酸亚甲蓝液染色5~10min。
(4)蒸馏水洗去染液。
(5)风干后二甲苯透明,l中性树胶封固。
3.染色结果11胃幽门螺杆菌呈蓝色。