(一)荧光桃红-酒石黄法

1.试剂配制

(1)天青石蓝染液：i

天青石蓝1110.5g

硫酸铁铵1111115g

蒸馏水11111100ml

纯甘油11111114ml

麝香草酚111150mg

用三角烧瓶盛蒸馏水，l加入硫酸铁铵，l用玻璃棒不断搅动至完全溶解；再加入天青石蓝，l煮沸2～3min；于沸腾时，l用玻璃棒不断轻轻搅动，l否则天青石蓝会在瓶底聚成片块状。待溶液冷却后过滤，l再加入纯甘油和麝香革酚。

(2)Mayer苏木精液：i

苏木精111110.1g

蒸馏水11111100ml

碘酸钠11111120mg

硫酸铝铵1111115g

柠檬酸11111100mg

水合氯醛1111115g

将苏木精置于蒸馏水中，l完全溶解后(可稍加温至约50℃)，l再加入碘酸钠和硫酸铝铵，l不断用玻璃棒搅动使其彻底溶解，l最后加入柠檬酸和水合氯醛，l过滤后即可使用。

(3)荧光桃红染液

荧光桃红111111110.5g

蒸馏水111111111100ml

(4)酒石黄液：i

酒石黄11111111112.5g

乙二醇单甲醚111100ml

2.染色程序

(1)组织块固定于4％中性甲醛液中，l常规脱水、i石蜡包埋和切片。

(2)切片脱蜡至水。

(3)天青石蓝液染3～5min。

(4)稍水洗。

(5)Mayer苏木精染3～5min。

(6)稍水洗。

(7)1％盐酸一乙醇分化。

(8)流水冲l0min。

(9)荧光桃红液染20～30min。

(10)稍水洗，l用滤纸吸去载玻片多余的水分。

(11)酒石黄液分化和复染，l在显微镜下控制。

(12)用95％乙醇稍洗。

(13)常规脱水、i透明，l中性树胶封固。

3.染色结果1111病毒包涵体呈亮红色，l红细胞呈橙黄至橙红色，l细胞核呈蓝褐色，l背景呈黄色。

(二)醛品红法

1.试剂配制

(1)酸化高锰酸钾水溶液：i

甲液：i0.5％高锰酸钾水溶液

高锰酸钾11110.5g

蒸馏水1111111l00ml

乙液：i0.5％硫酸水溶液

硫酸1111111110.5ml

蒸馏水11111199.5ml

甲、i乙两液分瓶盛装，l使用前等份混合。

(2）2％草酸液

草酸1111111112g

蒸馏水1111100ml

(3)醛品红液：i参见本节“三、i”项“(一)醛品红法”。

(4)橙黄G液：i参见本节“三、i”项“(一)醛品红法”。

2.染色程序

(1)组织块固定于4％中性甲醛液中，l常规脱水、i石蜡包埋和切片。

(2)切片脱蜡至水。

(3)酸化高锰酸钾水溶液氧化5min。

(4)稍水洗。

(5)2％草酸液漂白2～3min。

(6)流水冲洗5min。

(7)70％乙醇稍洗。

(8)醛品红液浸染5～10min。

(9)70％乙醇浸洗2次，l每次约30s，l至切片不再脱色为止。

(10)稍水洗。

(11)橙黄G液滴染约1s。

(12)稍水洗。

(13)常规脱水、i透明，l中性树胶封固。

3.染色结果1111肝细胞内的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)呈深紫色，l细胞核和背景呈不同程度的黄色。

(三)地衣红法

1.试剂配制

(1)酸化高锰酸钾水溶液：i

甲液：i0.5％高锰酸钾水溶液

高锰酸钾110.5g

蒸馏水1111100ml

乙液：i0.5％硫酸水溶液

硫酸11111110.5ml

蒸馏水111199.5ml

甲、i乙两液分瓶盛装，l使用前等份混合。

(2)2％草酸液：i

草酸1111111111112g

蒸馏水11111111100g

(3)地衣红乙醇液

地衣红1111111111111lg

70％乙醇1111111100ml

浓盐酸111111111111lml

将地衣红溶于70％乙醇，l然后加入浓盐酸，l放置1～2d后即可使用。

2.染色程序

(1)组织块固定于4％中性甲醛液中，l常规脱水、i石蜡包埋和切片。

(2)切片脱蜡至水。

(3)酸化高锰酸钾水溶液氧化5min。

(4)稍水洗。

(5)2％草酸液漂白2～3min。

(6)流水冲洗51min。

(7)70％乙醇稍洗。

(8)地衣红乙醇液浸染3～5h。

(9)70％乙醇浸洗2次，l每次约30s，l至染液不脱出为止。

(10)95％乙醇，l无水乙醇脱水。

(11)二甲苯透明，l中性树胶封固。

3.染色结果1111肝细胞内的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)呈深棕色，l细胞核和背景不着色或呈淡棕色。