主要方法是马休黄一酸品性红一苯胺蓝法。
1.试剂配制
(1)甲醛氯化汞液:i
5%氯化汞水溶液111190ml
甲醛(40%)111110ml
(2)天青石蓝染液:i参见本节“九、i”项“(一)荧光桃红一酒石黄法”。
(3)Mayer苏木精液:i参见第3章第一节“六、i”项“(四)HE染色试剂的配制”。
(4)马休黄染液:i
马休黄0.59
95%乙醇1111100ml
磷钨酸1111111112g
先把马休黄溶于95%乙醇,l再加人磷钨酸。
(5)酸性品红液:i
酸性品红1111111g
蒸馏水11111198ml
冰醋酸11111112ml
(6)苯胺蓝染液:i
苯胺蓝11111110.5g
蒸馏水11111199ml
冰醋酸11111111ml
(7)1%磷钨酸水溶液
磷钨酸111111111g
蒸馏水11111100ml
(8)1%醋酸水溶液:i
冰醋酸11111111ml
蒸馏水11111199ml
2.染色程序
(1)组织块固定于甲醛氯化汞液,l流水冲洗一夜,l常规脱水、i石蜡包埋和切片。
(2)切片脱蜡至水,l并进行除汞处理。参见本节“一、i”项“(二)Masson三色
(3)天青石蓝液染2~3min。
(4)稍水洗。
(5)Mayer苏木精液染2~3min。
(6)稍水洗。
(7)1%盐酸-乙醇分化。
(8)流水冲洗l0min。
(9)95%乙醇稍洗。
(10)马休黄液染2min。
(11)蒸馏水稍洗。
(12)酸性品红液染lOmin。
(13)蒸馏水稍洗。
(14)1%磷钨酸水溶液处理5min。
(15)蒸馏水稍洗。
(16)苯胺蓝液染5~l0min。
(17)1%醋酸水溶液洗去多余染液并分化。
(18)不用水洗,l以滤纸吸去周围水分。
(19)95Voo乙醇急速脱水,l再经无水乙醇脱水。
(20)二甲苯透明,l中性树胶封固。
3.染色结果1111纤维素呈鲜红色,l肌纤维呈红色,l细胞核呈蓝褐色,l胶原纤维呈蓝色,l红细胞呈黄色,l陈旧的纤维素呈紫蓝色。