(一)硫酸亚铁法
1.试剂配制
(1)硫酸亚铁水溶液:i
硫酸亚铁11112.5g
蒸馏水111111100ml
搅拌溶解后取其澄清液,l必要时过滤。
(2)铁氰化钾醋酸液:i
铁氰化钾1111111lg
蒸馏水11111199ml
冰醋酸11111111lml
(3)1%冰醋酸:i
冰醋酸11111111lml
蒸馏水111111199ml
(4)Van1Gieson染液:i参见本节“一、i”项“(一)Van1Gieson(VG)苦味酸-酸性品红法”。
2.染色程序
(1)组织块固定于4%中性甲醛液中,l常规脱水、i石蜡包埋和切片。
(2)切片脱蜡至水。
(3)蒸馏水再洗1次。
(4)硫酸亚铁液处理1h。
(5)蒸馏水洗数次,l每次3~5min。
(6)铁氰化钾醋酸液处理30min。
(7)1%醋酸水溶液稍洗。
(8)Van1Gieson液做对比染色,l约lmin。
(9)自来水速洗。
(10)95%乙醇脱水,l再经无水乙醇脱水。
(11)二甲苯透明,l中性树胶封固。
3.染色结果 黑色素呈绿色至墨绿色,l胶原纤维呈红色,l肌纤维呈黄色。
(二)银氨液浸染法
1.试剂配制
(1)氢氧化银氨液:i取10%硝酸银溶液20ml,l逐滴加入浓氢氧化铵(氨水)至产生沉淀,l然后继续滴加氢氧化铵使生成的沉淀又复溶解;溶液变清后,l再加入10%硝酸银数滴至溶液稍呈轻微混浊,l然后加入蒸馏水20ml,l过滤后使用。
(2)5%硫代硫酸钠液。
(3)0.2%氯化金水溶液。
(4)Van1Gieson液,l参见本节“一、i”项“(一)Van1Gieson(VG)苦味酸一酸性品红法”。
2.染色程序
(1)组织块固定于4%中性甲醛液中,l常规脱水、i石蜡包埋和切片。
(2)切片脱蜡至水。
(3)蒸馏水再洗1次。
(4)入氢氧化银氨液内于室温暗处作用12~18h。
(5)蒸馏水洗2~5S。
(6)0.2%氯化金水溶液处理2min。
(7)蒸馏水冼2~3min。
(8)5%硫代硫酸钠液处理2~3min。
(9)流水冲洗5min。
(10)Van1Gieson’S液做对比染色,l30~60s。
(11)自来水速洗。
(12)95%乙醇脱水,l再经无水乙醇脱水。
(13)二甲苯透明,l中性树胶封固。
3.染色结果11黑色素、i亲银颗粒和嗜铬颗粒呈黑色,l某些脂褐素也呈黑色。胶原纤维呈红色,l肌纤维呈黄色。