特殊染色和组织化学技术:钙盐染色

(一)硝酸银法

1.试剂配制

(1)1%硝酸银液

硝酸银111111111g

蒸馏水111111100ml

(2)2%硫代硫酸钠液

硫代硫酸钠1112g

蒸馏水11111100ml

2.染色程序

(1)组织块固定于4%中性甲醛液中,l常规脱水、i石蜡包埋和切片。

(2)切片脱蜡至水。

(3)蒸馏水再洗1次。

(4)切片人1%硝酸银液,l置于强阳光处作用15~60min。

(5)蒸馏水洗3min。

(6)2Vo硫代硫酸钠液处理2min。

(7)流水冲洗5min。

(8)苏木精液染4~6min。

(9)稍水洗。

(10)1%盐酸乙醇分化。

(11)流水冲洗10~15min。

(12)伊红液染2~3min,l稍水洗。

(13)常规脱水、i透明,l中性树胶封固。

3.染色结果111钙盐呈褐黑至深黑色,l细胞核呈蓝色,l背景呈红色。

(二)茜素红S法

1.试剂配制

茜素红S:i

液茜素红S11111112g

蒸馏水11111111100ml

将茜素红S溶解于蒸馏水后,l用10%氢氧化铵调整其pH至4.2(每100ml茜素红S液,l约加入10滴10%氢氧化铵)。

2.染色程序

(1)组织块固定于4%中性甲醛液中,l常规脱水、i石蜡包埋和切片。

(2)切片脱蜡至水。

(3)茜素红S液滴染3~5min。

(4)用滤纸吸干载玻片周围染液。

(5)丙酮洗数秒。

(6)丙酮二甲苯(1:i1)洗数秒。

(7)二甲苯透明2次,l中性树胶封固。

3.染色结果钙盐沉淀处呈橘红色。