(一)嗜银反应法
1.试剂配制
(1)缓冲硝酸银液:i参见本节“十六、i”项“(一)硝酸银法”。
(2)还原液:i参见本节“十六、i”项“(一)硝酸银法”。
以上两液均须在使用前配制。
(3)5%硫代硫酸钠液:i参见本节“十六、i”项“(一)硝酸银法”。
2.染色程序
(1)组织块固定于4%中性甲醛液中,l常规脱水、i石蜡包埋和切片。
(2)切片脱蜡至水,l用蒸馏水再洗2次。
(3)放人预热(60℃)的缓冲硝酸银液3h。
(4)用滤纸稍吸去载玻片周围的银液,l蒸馏水速洗。
(5)还原液(45℃)处理1min。
(6)蒸馏水洗,l显微镜下观察。
(7)5%硫代硫酸钠液处理lmin。
(8)流水冲洗l0min。
(9)95%乙醇和无水乙醇脱水。
(10)二甲苯透明,l中性树胶封固。
3.染色结果细胞质中的嗜银颗粒呈棕黑色。
(二)亲银反应
1.试剂配制
(1)银氨液:i取l0%硝酸银水溶液20ml,l逐滴加入氢氧化铵至产生沉淀;然后继续滴加氢氧化铵,l使生成的沉淀溶解,l溶液变清;再滴入10%硝酸银数滴至溶液轻微混浊,l然后加入蒸馏水20ml,l过滤后使用。
(2)1%氯化金水溶液:i参见本节“八、i”项“(二)六胺银法”。
(3)5%硫代硫酸钠液:i
硫代硫酸钠11115g
蒸馏水111111l00ml
(4)核固红液:i参见本节“二、i”项“(一)氢氧化银氨液浸染法(I)”。
2.染色程序
(1)组织块固定于4%中性甲醛液中,l常规脱水、i石蜡包埋和切片。
(2)切片脱蜡至水,l蒸馏水再洗1次。
(3)将切片放入银氨液中,l于室温下暗处作用24~48h。
(4)蒸馏水洗。
(5)0.2%氯化金水溶液调色lmin。
(6)蒸馏水洗。
(7)5%硫代硫酸钠液处理1~2min。
(8)流水冲洗5min。
(9)核固红液复染胞核5~lOmin。
(10)自来水速洗。
(11)95%乙醇、i无水乙醇脱水。
(12)二甲苯透明,l中性树胶封固。
3.染色结果11细胞质中的亲银颗粒呈黑棕色,l黑色素也呈黑色,l细胞核呈红色。