主要方法是甘氨酸银浸镀法。

1.试剂配制

(1)酸性甲醛液：i

甲醛(40％)液11111125ml

蒸馏水1111111111175ml

1％硝酸水溶液110.2ml

(2)5％甘氨酸水溶液：i

甘氨酸111111111115g

蒸馏水111111111l00ml

(3)甘氨酸银溶液：i

硝酸银11111111111115g

硝酸钾11111111111110g

蒸馏水1111111111100ml

5％甘氨酸水溶液1111ml

(4)还原液：i

焦性没食子酸11111111g

蒸馏水1111111111145ml

无水乙醇11111111155ml

1％硝酸水溶液110.2ml

配制24h后使用。

(5)氯化金水溶液：i参见本节“八、i”项“(二)六胺银法”。

(6)苯胺油乙醇液：i

50％乙醇1111111l00ml

苯胺油11111111112滴

(7)5％硫代硫酸钠：i参见本节“十六、i”项“(一)硝酸银法”。

2.染色程序

(1)组织块固定于20％中性甲醛一生理盐水溶液中5～l0d。常规脱水、i石蜡包埋和切片(切片厚4～6um)。

(2)切片脱蜡至水。

(3)入酸性甲醛液，l室温下处理5～l0min。

(4)蒸馏水洗3次，l每次约2min。

(5)把切片置入甘氨酸银液中，l于室温(20～25℃)下作用15～30min；如果在37℃温箱内作用需4～5min。

(6)取出切片用滤纸吸干载玻片多余银液。

(7)用预热(45℃)的还原液作用1～2min。

(8)用50％乙醇洗切片5～10s，l再用蒸馏水洗，l然后在显微镜下观察切片。如颜色仍淡可由第三步开始再重复一次，l但应减少在甘氨酸银液的浸镀时间，l并把在还原液作用时的温度降至37℃。

(9)入氯化金水溶液数分钟，l直至黄棕色脱去。

(10)滴入苯胺油乙醇加强染色，l约15s或更长些。

(11)流水冲洗切片。

(12)5％硫代硫酸钠液处理lmin。

(13)流水冲洗。

(14)常规脱水、i透明，l中性树胶封固。

3.染色结果1111神经纤维呈棕黑至黑色。