特殊染色和组织化学技术:神经髓鞘染色

主要方法是砂罗铬花青法。

1.试剂配制

(1)10%硫酸铁铵水溶液:i

硫酸铁铵1111 10g

蒸馏水  1 l00ml

(2)砂罗铬花青染液:i

砂罗铬花青R   1111111110.2g

蒸馏水1111111111111111111196ml

10%硫酸铁铵水溶液1111111114ml

浓硫酸111111111111111111110.5ml

依次溶解,l充分混合。

(3)荧光桃红染液:i

荧光桃红B1111111111111111110.5g

0.5%氯化钙水溶液11111111100ml

2.染色程序

(1)组织块固定于4%中性甲醛液中(不少于3d为宜),l常规脱水、i石蜡包埋和切片(切片厚4~6扯m)。

(2)切片脱蜡至水。

(3)滴加砂罗铬花青染液于切片上,l室温下染15~20min。

(4)倾去染液,l流水冲洗1~2min。

(5)10%硫酸铁铵水溶液分化1~5min,l至胶原纤维和肌纤维接近无色或淡灰色,l髓鞘呈清晰的蓝色为止。每次取出切片水洗后,l应在显微镜下观察控制。

(6)流水冲洗5~l0min。

(7)荧光桃红液复染1~3s。

(8)稍水洗后,l各级乙醇脱水。

(9)二甲苯透明,l中性树胶封固。

3.染色结果髓鞘呈鲜蓝色,l红细胞呈深蓝色,l神经细胞细胞质、i肌纤维和胶原纤维呈鲜红色,l细胞核和核仁呈蓝色,l神经纤维不着色。