特殊染色和组织化学技术:脂肪染色

主要方法是苏丹Ⅳ/苏丹Ⅲ/苏丹Ⅱ法。

1.试剂配制

(1)苏丹iV(或苏丹Ⅲ、i苏丹Ⅱ)染液:i

苏丹Ⅳ(或苏丹Ⅲ、i苏丹Ⅱ)110.5g

70%乙醇111111111111111111150ml

丙酮1111111111111111111111150ml

取一只洁净的l00ml小口砂塞瓶,l先倒入70%乙醇和丙酮混和,l再加入苏丹Ⅳ(或苏丹Ⅲ、i苏丹Ⅱ),l不时摇动,l使尽量溶解至饱和,l待1~2d后过滤至另一小口砂塞瓶内密封保存备用(也可不过滤,l用时吸其上清液)。

(2)Mayer苏木精液:i参见第3章第一节“六、i”项“(四)HE染色试剂的配制”。

2.染色程序

(1)组织块固定于4%中性甲醛液中。

(2)冷冻切片,l厚6~10um,l如为新鲜组织,l须用40%中性甲醛液固定10min,l稍水洗后,l用60%乙醇稍洗。

(3)苏丹Ⅳ(或苏丹Ⅲ、i苏丹Ⅱ)染液浸染1~2min。

(4)70%乙醇稍洗去多余染液。

(5)流水稍洗。

(6)Mayer苏木精液复染胞核,l必要时用1%盐酸一乙醇分化。

(7)水洗10min,l或于稀碳酸锂水溶液中促蓝。

(8)阿拉伯糖胶或甘油明胶封盖。

3.染色结果11中性脂肪呈猩红色(用苏丹Ⅳ染色)、i橙红色(用苏丹Ⅲ染色)或橙黄至橙红色(用苏丹Ⅱ染色),l细胞核呈蓝色。