主要方法是高碘酸一无色品红(PAS)法。

1.试剂配制

(1)0.5％高碘酸水溶液：i参见本节“八、i”项“(一)高碘酸一无色品红(PAs)法”。

(2)0.5％偏重亚硫酸钠水溶液：i参见本节“八、i”项“(一)高碘酸一无色品红(PAS)法”。

(3)无色品红液(Schiff试剂)：i参见本节“八、i”项“(一)高碘酸一无色品红(PAs)法”。

(4)Mayer苏木精液：i参见第3章第一节“六、i”项“(四)HE染色试剂的配制”。

(5)1％甲基绿水溶液：i

甲基绿11111111g

蒸馏水1111100ml

用三氯甲烷抽提，l除去甲紫成分后使用。抽提方法参见本节“二十三、i”项“(二)甲基绿派洛宁法”。

(6)1％淀粉酶：i

淀粉酶11111111g

蒸馏水1111100ml

(7)唾液：i用烧杯收集唾液(必要时可在舌尖上滴加1滴1％冰醋酸，l促使唾液分泌)，l用玻棒搅拌均匀，l加入5～10倍蒸馏水稀释，l再用玻棒搅拌数分钟，l用双层纱布过滤后使用。

2.染色程序

(1)取新鲜薄片组织，l立即用Gendre液固定6～12h或Carnoy液固定3～6h，l其间可更换两次相应的固定液，l然后转入95％乙醇。

(2)无水乙醇按常规脱水透明，l石蜡包埋，l切片厚4～5um。

(3)取两张连续切片，l分别作A和B记号，l然后把B片脱蜡至水。

(4)把B号切片置入预热至37℃的1％淀粉酶液，l于37℃温箱内消化1h，l或用预热至37℃的唾液在37℃温箱消化30min。

(5)取出切片稍水洗。

(6)在消化过程中，l把A片脱蜡至水。

(7)在A、iB两片同时滴人0.5％高碘酸水溶液氧化5～8min。

(8)流水冲洗2min，l再用蒸馏水洗1次。

(9)于暗处，l无色品红液加盖染色]0～20min。

(10)用0.5％偏重亚硫酸钠液滴洗2次，l每次约1min。

(11)流水冲洗2min。

(12)1％甲基绿水溶液复染胞核3～5min，l或用Mayer苏木精液浅染细胞核(必要时用盐酸乙醇分化，l再用流水冲洗)。

(13)稍水洗。

(14)常规脱水、i透明，l中性树胶封固。

3.染色结果11A片上的细胞质内呈现亮红色颗粒为阳性(显示糖原)，l经消化后的B片应为阴性。