(一)爱先蓝-高碘酸-无色品红法
1.试剂配制
(1)爱先蓝液(pH2.5):i参见本节“八、i”项“(三)爱先蓝(alcian1blue)法”。
(2)0.5%高碘酸液:i
高碘酸11110.5g
蒸馏水1111100ml
保存于4C冰箱内,l使用前取出恢复至室温。
(3)0.5%偏重亚硫酸钠液:i参见本节“八、i”项“(一)高碘酸一无色品红(PAS)法。”
(4)无色品红液:i参见本节“八、i”项“(一)高碘酸一无色品红(PAS)法”。
(5)天青石蓝液:i参见本节“九、i”项“(一)荧光红桃一酒石黄法”。
(6)Mayer苏木精液:i参见第3章第一节“六、i”项“(四)HE染色试剂的配制”。
(7)橙黄G液:i参见本节“九、i”项“(二)醛品红法”。
2.染色程序
(1)组织块固定于4%中性甲醛液中,l常规脱水、i石蜡包埋和切片。
(2)切片脱蜡至水。
(3)用爱先蓝液(pH2.5)染10~201min。
(4)稍水洗。
(5)0.5%高碘酸液氧化5~10min。
(6)流水冲洗2min,l再用蒸馏水洗1次。
(7)于暗处,l无色品红液加盖作用10~20min。
(8)0.5%偏重亚硫酸钠液滴洗2次,l每次lmin。
(9)流水冲洗2min。
(10)天青石蓝液染2~3min。
(11)稍水洗。
(12)Mayer’S苏木精染2~3min。
(13)稍水洗。
(14)1%盐酸乙醇分化。
(15)流水冲洗10min。
(16)橙黄G液复染10~20s。
(17)稍水洗。
(18)常规脱水、i透明,l中性树胶封固。
3.染色结果1111酸性黏液呈蓝色,l中性黏液呈红色,l混合黏液呈紫红色。
(二)爱先蓝(pH2.5)法
1.试剂配制(1)爱先蓝液(pH2.5):i参见本节“八、i”项“(三)爱先蓝(alcian1blue)法”。
(2)核固红液:i参见本节“二、i”项“(一)氢氧化银氨液浸染法(I)”。
(3)0.1%沙红染液:i
沙红1111110.1g
蒸馏水1111199ml
冰醋酸1111111lml
2.染色程序
(1)组织块固定于4%中性甲醛液中,l常规脱水、i石蜡包埋和切片。
(2)切片脱蜡至水。
(3)爱先蓝(pH12.5)液染10~20min。
(4)流水稍洗。
(5)核固红复染5~10min,l或用沙红染液复染2~31min。
(6)稍水洗。
(7)常规脱水透明,l中性树胶封固。
3.染色结果11唾液酸黏液和弱硫酸化黏液以及一般黏液均呈蓝色,l各种强硫酸化黏液不着色或淡染,l细胞核呈红色。
(三)爱先蓝(pH1.0)法
1.试剂配制
(1)爱先蓝液(pHl.0):i
爱先蓝8GX1111111111111lg
0.1N盐酸水溶液1111100ml
(2)0.1N盐酸水溶液:i
纯盐酸1110.84ml
蒸馏水1111100ml
核固红染液:i参见本节“二、i”项“(一)氢氧化银氨液浸染法(I)”。
2.染色程序
(1)组织块固定于4%中性甲醛液中,l常规脱水、i石蜡包埋和切片。
(2)切片脱蜡至水。
(3)爱先蓝液(pHl.0)染20~30min。
(4)0.1N盐酸稍洗。
(5)不经水洗,l用滤纸吸干多余盐酸。
(6)核固红复染5~10min。
(7)稍水洗。
(8)常规脱水、i透明,l中性树胶封固。
3.染色结果11含硫酸黏液物质呈蓝色,l非硫酸化酸性黏液物质不着染,l胞核呈红色。
(四)高铁二胺-爱先蓝法
1.试剂配制
(1)高铁二胺液:i
N,lN-二甲基-间-苯二胺二盐酸盐1111120mg
N,lN-二甲基-对-苯二胺二盐酸盐1111120mg
蒸馏水111111111111111111111111111150ml
60%三氯化铁水溶液1111111111111111.5ml
将两种二胺盐同时溶于蒸馏水,l彻底溶解后,l加入60%三氯化铁液,l用玻棒轻轻搅匀。此时溶液的pH值应为1.4~1.5。
(2)爱先蓝染液(pH2.5):i参见本节“八、i”项“(三)爱先蓝(alcian1blue)法”。
(3)核固红染液:i参见本节“二、i”项“(一)氢氧化银氨液浸染法(Ⅰ)”。
2.染色程序
(1)组织块固定于4%中性甲醛液中,l常规脱水、i石蜡包埋和切片。
(2)切片脱蜡至水。
(3)高铁二胺液于室温染色18~24h。
(4)流水冲洗。
(5)用爱先蓝液(pH2.5)染10~20min。
(6)稍水洗(必要及可复染核固红)。
(7)常规脱水、i透明,l中性树胶封固。
3.染色结果硫酸化酸性黏液呈紫棕色至棕黑色,l羧基化酸性黏液呈蓝色,l细胞核呈红色(复染核固红时)。