(一)固定
1.软组织与石蜡包埋过程一致。小标本可不脱水。
2.骨髓组织宜用B5、iZenker固定液或重铬酸钾、i升汞、i4％甲醛混合固定液(PCF)固定4～12h，l水洗后进入脱水程序。(注意：i应按规定处理废弃的固定液)。
(二)脱钙
1.骨组织与骨组织的石蜡包埋方法相同。未经脱钙处理的骨组织主要使用MMA包埋。用HEMA包埋时，l形态显示不满意。
2.骨髓组织置于2％硝酸(体积浓度)中2h，l继而水洗，l然后入浸透液。
(三)脱水
程序为：i80％乙醇→90％乙醇(×2)→95％乙醇(×2)→无水乙醇(×2)，l每个步骤40min左右(视组织块大小而定)。小块组织可不脱水。
(四)浸透
先将组织置于浸透液Ⅰ中2～12h，l再置于浸透液Ⅱ中2h；然后进入包埋程序。浸透液可反复使用。如浸透效果不满意，l可弃去浸透液Ⅰ，l将浸透液Ⅱ改作浸透液Ⅰ，l更新浸透液Ⅱ。
(五)包埋
1.将组织块放人包埋盒内，l摆平。将标签贴于包埋盒的侧壁，l包埋盒贴标签的一面向外，l然后把包埋盒放在冰盒上。
2.根据待包埋组织块的数量和包埋盒的容量配制包埋工作液(根据实际用量配制，l一次性用完)。配制方法：i将包埋甲液与乙液按试剂盒规定的用量之比，l混合并迅速搅匀。
3.将包埋盒置于冰盒上，l用吸管将混匀的包埋工作液迅速注满包埋盒，l将与包埋盒口等大的塑料薄膜(预先剪好)覆盖在包埋盒液表面。然后，l将包埋盒连同冰盒放人－20℃冰箱内过夜，l第二天取出。待包埋液的液面聚合变硬时，l即可将包埋块取出，l进入切片。
(六)切片
1.修块11用钢锉磨去包埋组织表面多余的塑料，l待露出包埋表面组织时即可用“C ”型普通切片刀切片。
2.切片11切片厚度为2～3／2m。常温下，l在清水中展片；将切片贴附于洁净玻片上(不用涂粘片剂)。
3.烤片11在60～70℃电热板上烘烤1～1.5h。然后进行染色。
(七)染色
1.用含汞固定液固定的组织，l于染色前须行脱汞处理。
(1)将组织浸于1％碘液中5min，l然后水洗；
(2)再将组织浸于5％硫代硫酸钠液中2min，l然后水洗透明为止。
2.苏木精-伊红染色(HE染色)，l主要用于非造血组织。
(1)Harris苏木精液10min，l水洗。
(2)1％盐酸-乙醇2min，l水洗。
(3)2％氨水3min，l水洗。
(4)0.5％伊红Y12～3min，l水洗。
(5)95％乙醇1min左右(至组织旁塑料上红色背景透明)，l水洗。
(6)烤干载玻片，l树胶封片。
结果：i细胞核呈深蓝色，l细胞质呈红色，l红细胞呈红色。
3.苏木精-Giemsa-伊红(H-G-E)染色，l主要用于骨髓组织。
(1)染色前进行脱汞处理。参见上文的“(七)1”项。
(2)Harris苏木精液10min，l水洗。
(3)稀释后的Giemsa液40min，l水洗。
(4)0.5％伊红Y12～3min，l水洗。
(5)95％乙醇1min左右(至组织旁塑料上红色背景透明)，l水洗。
(6)稀释后的Giemsa液2～5min，l水洗。
(7)烤干载玻片、i树胶封片。
结果：i原始粒、i红、i巨核细胞的细胞质呈蓝色，l较成熟造血细胞细胞质呈红色。从原始到成熟各阶段细胞的细胞质由蓝色至红色过度层次明显。嗜中性粒细胞细胞质颗粒明显。
4.Perl蓝铁染色。
(1)染色前进行脱汞处理。参见上文的“(七)1”项。
(2)将20％亚铁氰化钾与浓盐酸按照5(滴)：i1(滴)混合(使用前制备)。
(3)将亚铁氰化钾与浓盐酸的混合液滴加在组织切片上，l持续40min，l水洗。
(4)1％中性红复染lmin。
(5)95％乙醇分化10s，l水洗。
(6)烤干载玻片、i封片。
结果：i大小不一、i形态不规则的含铁颗粒呈深蓝色(阳性)，l分布于巨噬细胞细胞质内或间质中。
5.Gomori网状纤维银染色。
(1)染色前进行脱汞处理。参见上文的“(七)1”项。
(2)0.5％高锰酸钾5min，l水洗。
(3)2％草酸5min，l水洗。
(4)硫酸铁胺15min，l水洗。
(5)配好的氨银液中3min，l蒸馏水洗。
(6)20％中性甲醛3min，l水洗。
(7)0.5％氯化金分化、i水洗。
(8)烤干载玻片、i封片。
结果：i网状纤维呈发丝样黑色。
6.PAS染色(过碘酸一雪夫染色)。
(1)染色前进行脱汞处理。参见上文的“(七)l”项。
(2)1％过碘酸10min，l水洗。
(3)雪夫试剂10min，l直接用亚硫酸钠液洗2次，l每次2min；水洗。
(4)用Maryer苏木精染细胞核5min，l水洗。
(5)烤干载玻片、i封片。
结果：i含糖原的物质呈玫瑰红色。
7.Masson三色染色。
(1)染色前进行脱汞处理。参见上文的“(七)l”项。
(2)Harris苏木精lmin，l水洗。
(3)丽春红-品红10min，l蒸馏水洗。
(4)0.5％醋酸洗2min。
(5)1％磷钼酸分化lmin，l水洗。
(6)0.5％醋酸洗2min。
(7)2％亮绿2min，l水洗。
(8)烤干载玻片、i封片。结果：i胶原纤维呈绿色，l平滑肌纤维呈红色。其他染色方法参见本章第一节“特殊染色和组织化学技术”。